Dogma central de la Biología Molecular Replicación
ADN Transcripción
ARN Traducción
Proteínas
Tema 7. Transcripción en procariotas
Transcripción z
Molde
z
Sustratos
z
Aparato de transcripción
Molde
Unidad de Transcripción z
Promotor
z
Región codificante
z
Terminador
Sustrato z
rNTPs
Aparato de transcripción z
ARN polimerasa
ω
ω
Transcripción en procariotas Etapas z
Iniciación: z Aparato
z
Elongación z ARN
z
de transcripción + Promotor
polimerasa
Terminación z Separación
Iniciación 1.
Reconocimiento del promotor
2.
Burbuja de transcripción
3.
Enlaces entre rNTPs
4.
Separación Aparato de transcripciónPromotor
Promotores
Elongación z z z
Movimiento de la ARNpol en dirección 3’ Separación momentánea de la doble hebra de ADN: Burbuja Velocidad: 40 n/seg
Terminación Fin de la síntesis de ARN z Separación ARN-ARNpol z Separación ARN-ADN z
– –
Dependientes de rho Independientes de rho
Terminadores independientes de rho
z z
Repeticiones invertidas Hexa A
Terminadores dependientes de rho z z
ADN que provoca pausa ARN sin estructura secundaria → unión a rho
Resumen z z z z z z z
Transcripción: selectiva ARN a partir de ADN simple cadena Sustrato: RNTPs Dirección 5’ → 3’ ARN pol: compleja, multímero, core + σ Promotores: sec consenso Terminador
Tema 9. Transcripción en eucariotas
Transcripción en eucariotas z
Iniciación
z
Elongación
z
Terminación
ARN polimerasas z z
z
ARNpol I → ARNr grandes ARNpol II → pre ARNm ARNsn ARNsno ARNpol III → ARNt ARNr pequeño ARNrs
Nucleosoma z z z
Modificación estructural ADN laxo Diversas proteínas
Iniciación Promotores z Potenciadores z ARNpol II + Factores de transcripción general → Aparato de transcripción basal z Proteínas activadoras z
Promotores z
Promotor mínimo
z
Promotor regulativo
Ensamblaje
Potenciadores
Elongación z z
Movimiento en dirección 3’ Complejo
Terminación z
ARN pol II transcribe mas allá de la señal de terminación pasando a través de varias regiones AATAAA.
z
El pre-ARNm que transporta esta señal en forma de AAUAAA se rompe por una endonucleasa que reconoce la señal y corta entre 11 y 30 residuos hacia el lado 3’
z
Luego se añade una cola poli-A de hasta 200pb mediante una polimerasa especial que no esta dirigida por un molde
Procesamiento del ARNm
¿Qué es un gen? z
Factor hereditario que determina un rasgo.
z
Conjunto de nucleótidos que codifica la secuencia de aminoácidos de una proteína.
z
Incompletas, simplificadas.
Organización del gen: colinealidad z z
Bacterias y virus Excepción: codón stop
ARN mensajero z z z
Transportador de la información desde el ADN al ribosoma → proteína 1aa → 1 codón (triplete) Estructura
Procesamiento del pre ARNm z
Bacteria: transcripción y traducción simultáneas
z
Eucariotas: transcripción y traducción con separación espacial y temporal
z
Pre ARNm (transcripto primario) → ARNm (maduro)
Procesamiento del pre ARNm z
Extremo 5’: caperuza o capuchón
z
Extremo 3’: poliadenilación
z
Región codificante: corte y empalme
Caperuza 5’
z z z
Inicio de traducción Estabilidad del ARNm Participación en el corte y empalme
Cola poliA z z
50 a 250 A Clivaje de extremo 3’ y adición de cola poliA
z
Estabilidad por proteínas de unión a la cola
Intrones z z
Regiones codificantes: Exones Regiones no codificantes: Intrones
Características del corte y empalme z z
Esencial para el traslado del ARN del núcleo al citoplasma No se altera el orden de los exones
Corte y empalme: remoción de intrones
Corte y empalme
Empalmosoma
z
ARNsn + proteínas: RNPsn –
z
U1, U2, U4, U5 y U6
Proteínas no asociadas a ARNsn
Autoempalme: Grupo I
Autoempalme: Grupo II
Procesamientos alternativos z
Empalme alternativo
z
Múltiples sitios de clivaje 3’
z
Proteínas diferentes a partir de la misma secuencia de ADN
Empalme alternativo
Múltiples sitios de clivaje 3’
Edición del ARN z
DOGMAS
z
¿Un gen: una proteína?
z
¿Toda la información de la secuencia de aminoácidos de una proteína reside en el ADN?
ARN de transferencia z z z z
Adaptador entre Nucleótidos y AA. Un ARNt para cada AA. 30 a 40 tipos: codificados por genes distintos. 74 a 95 nucleótidos.
Estructura: bases modificadas
Procesamiento del ARNt z z z z
Varios ARNt en un transcripto: corte Remoción de nucleótidos en 3’ y 5’ Modificación de bases Adición de bases
Ribosomas z z z
20000 por célula + de 50 proteínas y ARN ribosomal Subunidad pequeña + subunidad grande
