BIENVENIDOS A HEMATOLOGIA CLINICA 2012 Fa.C.E.N.A-U.N.N.E

EQUIPO DOCENTE 

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Profesora responsable: Bqca. Maria Cristina Guevara Jefa de trabajos prácticos Ordinaria: Bqca. Rina Tejada de Martínez Auxiliar Docente de Primera Ordinaria: Bqca. Alejandra Sánchez Jefes de trabajos prácticos Adscriptos:, Bqco. Gonzalo Ojeda, Bqca. Claudia Serrano, Bqca. María Victoria Iván Alumnos Adscriptos: Flores Ezequiel, Toñanes Cinthia, De Franceschi Cristina, Hochmuth Ingrid, Radovancich Virginia, Arechavala Milagros.

MODALIDAD DE CURSADO 

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Teorías: 4h semanales, asistencia voluntaria con exposición de contenidos conceptuales a cargo del docente. Ateneos: 2h al finalizar cada bloque conceptual, asistencia obligatoria, discusión grupal de temas teóricos y análisis de casos clínicos a cargo de los alumnos, bajo coordinación docente. Laboratorios: 2h semanales, trabajos prácticos individuales de asistencia obligatoria, con desarrollo de tareas pre-analíticas, analíticas, discusión de resultados y elaboración de informe escrito.

REGIMEN DE REGULARIZACION Y PROMOCION 

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Promocionan la asignatura los alumnos que obtienen 8(ocho) de 10 (diez) puntos o más en TODAS las evaluaciones parciales (teóricas y prácticas), aprueben el 80% de los laboratorios, asistencia al 100% de ateneos y obtienen 8(ocho) de 10(diez) puntos o más en un exámen integrador al final del cursado. Regularizan la materia quienes obtienen entre 6(seis) y menos de 8 (ocho) de 10 (diez) puntos en las evaluaciones parciales, incluyendo sus recuperatorios, aprueben el 75% de los laboratorios y ateneos.

EVALUACION La evaluación del alumno será realizada a través de 2 (dos) evaluaciones parciales que incluirán los conocimientos teóricos y prácticos adquiridos. EVALUACION PRACTICA

EVALUACION TEORICA

CONTACTO HEMATOLOGIA CLINICA

www.hematologiaclinicafacena.ecaths.com

HEMATOPOYESIS *Es el mecanismo fisioló´´gico

responsable de la formación continua de células sanguíneas, producidas a partir de la maduración de las SC pluripotentes localizadas en MO

HEMATOPOYESIS INTRAUTERINA *Las 1º SC aparecen en: Saco vitelino Región Mesonefro aorto gonadal (eritropoyesis megaloblástica) *En la 5º semana de gestaciòn: Higado Fetal:Eritropoyesis Granulopoyesis Megacariocitopoyesis LB (màximo 3º al 6ºmes)

HEMATOPOYESIS INTRAUTERINA *A la 8º semana algunas SC migran a la MO(prog.mieloide) y a Timo para producir L-T *A las 10-12 semanas las SC colonizan el Bazo y producen solo progenies mieloides

HEMATOPOYESIS INTRAUTERINA *La MO comienza a actuar como órgano hematopoyético al 3º mes de vida, casi simultáneamente con los huesos. Asume el rol Hemocitopoyético al 6º mes, actuando a pleno en el nacimiento y solo restando algunos focos de mielopoyesis en el higado *La Linfopoyesis se produce en el Hígado fetal, Timo y el epiplón desde las 8-14 semanas de Gestación,en el 2º trimestre en la MO, quien Produce L-B y cel pre –T que luego maduran a L-T en el Timo

Hematopoyesis fetal Islotes sanguíneos Saco vitelino 2ª semana

Eritroblastos primitivos Eritrocitos nucleados Hb fetal

Hígado/Bazo Tercer mes

Eritrocitos anucleados Hb adulto Granulocitos Megacariocitos

Médula osea 5º mes

Todos los tipos celulares

MEDULA OSEA *MO roja (activa). Está presente en todos los huesos hasta el 3º año de vida *En el adulto solo se encuentra en huesos planos y en las epìfisis de los largos En el resto hay MO adiposa (reversible según las necesidades) o MO gris irreversible

COMPARTIMENTOS MEDULARES *Compartimento Celular: Tejido Hemocitopoyetico Estroma Celular *Compartimento Vascular

TEJIDO HEMOCITOPOYETICO *Compartimento SC Progenitoras a:Stem cells pluripotentes b:Stem cell comprometidas *Compartimento de Proliferaciòn y Diferenciaciòn :Progenitores *Compartimento Madurativo o de Reserva

Célula madre: UFC-LM 

Son células indiferenciadas morfológicamente



Esta célula madre es pluripotencial porque da lugar a las posteriores células madre linfomieloide

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Tiene capacidad de autoduplicación,pero menos que la stem cell La UFC-LM da lugar a dos lineas celulares:

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• •

UFCUFC-M UFCUFC-L Lodish y cols.: ”Molecular Cell Biology”.5º Ed. W.H. Freeman 2004

UFC-L y UFC-M  Células indiferenciadas morfológicamente  Células multipotenciales, que darán origen

a las células progenitoras tanto de la línea mieloide como de la línea linfoide  Poseen capacidad de autoduplicación

Células Progenitoras 

Serie mieloide UFC-M 

   

•

UFC-GM: para granulocitos y monocitos: • UFC-G:unidad formadora de granulocitos neutrófilos • UFC-M: unidad formadora de monocitos UFC-Eo: unidad formadora de eosinófilos UFC-Bas:unidad formadora de basófilos UFC-E: unidad formadora de eritrocitos UFC-MK: unidad formadora de plaquetas

Serie linfoide UFC-L   

UFC-LB: unidad formadora de linfocitos B UFC-LT: unidad formadora de linfocitos T También en esta serie se originan las células NK

CELULAS PRECURSORAS 

Son células precursoras de las células terminales maduras

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Son células maduras con características morfológicas y funcionales específicas para cada tipo de célula final sanguínea:  Eritroblastos: para la línea de los hematíes

 Megacarioblastos:para la línea de plaquetas  Monoblastos:para la línea de los monocitos  Mieloblastos: para las línas de neutrófilos, eosinófilos y basófilos  Linfoblastos:para la línea de los linfocitos

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Los “blastos” mantienen su capacidad de autoduplicación y diferenciación celular de una forma mínima, adquiriendo las características de células maduras y terminales por el proceso de maduración

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Las células precursoras son ya reconocibles morfologicamente

CELULAS TERMINALES 

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

       

Permanecen en MO hasta alcanzar todas sus propiedades distintivas y funcionales Son las células que circulan en sangre periférica (SP) con unas características morfologicas y funcionales exclusivas No tienen capacidad de autoduplicación, proliferación y diferenciación celular Las células que circulan en SP son: Eritrocitos, Plaquetas, Monocitos, Neutrófilos Eosinófilos, Basófilos Linfocitos T y B

HEMATOPOYESIS *Requiere de la presencia de Stem cells de alta capacidad proliferativa:HSC *Requiere un adecuado Microambiente Hemocitopoyetico:MAH Células estromáticas Matriz extracelular Vasos sanguineos

COMPARTIMENTOS DE SC PLURIPOTENTES *Son de origen clonal *Capacidad de diferenciarse a múltiples linajes *Capacidad de autorrenovarse en poblaciones similares de SC *Se reconoce por sus marcadores de superficie:Son CD34+, c-kit o Factor steel+(CD117) *Resistente al 5-fluouracilo

ESQUEMA BÁSICO Célula madre (pluripotente)  Células progenitoras  Células diferenciadas  Muerte (programada o por envejecimiento) en días o meses

Lodish y cols.: ”Molecular Cell Biology”.5º Ed. W.H. Freeman 2004

MATRIZ EXTRACELULAR *Fibronectina *Tromboespondina *Laminina *ColagenoII *ColagenoIV(membrana basal) *Hemonectina *Colageno I y III paredes microvasculares *Glucosaminglicanos,mucopolisacaridos àcidos Y proteoglicanos

VASOS SANGUINEOS *Forman un esqueleto estructural entre el estroma y las células libres *Los capilares sinusoides constan de: Endotelio Membrana Basal Adventicia

ADHESIÒN Y HOMING CELULAR *Las células madres y progenitores hematopoyéticas CD34+tienen múltiples receptores de adhesión ,lo que le facilita unirse a los componentes celulares y de la matriz, le permite su alojamiento en la médula y le suministra los contactos célula –célula que son necesarios para la supervivencia celular y la proliferación estable y regulada

HEMATOPOYESIS

*Comienza con la expresión en la superficie

celular de las HSC de receptores para distintas citoquinas y moleculas de adhesión que le permiten unirse a células del MAH *Luego se produce la unión de los receptores de las citoquinas sinérgicas que comprometen las células hacia las estirpe mieloide y linfoide *Por último actúan las citoquinas de linaje especifico

PROTEINAS DE ADHESIÒN *Integrinas *Inmunoglobulinas *Lectinas *Sialomucinas *otros:CD38(ADP-ribosilciclasa) CD144(cadherina)

HSC *Solo pueden ponerse en evidencia por pruebas funcionales e inmunológicas in vitro.(marcaje de antigenos de diferenciación y anticuerpos monoclonales) y por cultivos celulares en agar o metilcelulosa *Células mononucleares Relaciòn N/C alta

agranulares:

CÈLULAS DEL ESTROMA MEDULAR *Células madres Mesenquimales: Fibroblastos-Fibrocitos Adventicia- Adipocitos Osteoblastos *Macrofagos osteoclastos Celulas dendriticas *Cel.Endoteliales vasculares

MEDULA OSEA

CÈLULAS DEL ESTROMA MEDULAR Producen: *Citoquinas solubles *Componentes de la Matriz Extracelular MEC

CITOQUINAS *Son

sintetizadas por el MAH regulan la proliferación y diferenciación de las SC precursoras y de los progenitores actuando tanto como: Activadores o Inhibidores

*Algunas afectan las Sc otras , son activadores de un linaje especifico o permiten la expresión de genes que codifican Factores de Crecimiento en células auxiliares *Muchas actúan en forma sinérgica

CLASIFICACIÒN *INTERLUQUINAS(1 AL 18) La IL-1 es producida por el macrófago, actúa en forma sinérgica con IL-6 y otros factores para permitir el compromiso de la SC. Actùa sobre el LT para la producción de IL-2. La mayoria de las IL son producidas por las células estromáticas o por el LT. *FACTORES ESTIMULANTES DE COLONIAS(FSC) *ERITROPOYETINA(EPO) Y TROMBOPOYETINA(TPO)

CITOQUINAS Pueden dividirse en 3 grupos según la célula blanco: *DE ACCIÒN SINERGICA:IL-1,IL-4,IL-6,PGDF *MULTIFACTORES:afectan a la mayoria de los progenitores y pueden dar lugar a mas de un linaje:IL-3,GM-CFS *FACTORES DE ESPECIFICO:EPO,TPO,IL-4,IL-5

LINAJE

Factores Reguladores De La Hematopoyesis 

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Factores Estimuladores  SCF (Stem cell factor, CD117)-cKit  Eritropoyetina (EPO) Factores estimuladores de colonias (CSF)  CSF-GM (granulocitos-monocitos)  CSF-G (granulocitos)  CSF-M (monocitos-macrofagos)  Trombopoyetina Citoquinas  Interleuquinas  Quimioquinas Hormonas: tiroideas, insulina..

Nombre

Origen

Actividad principal en cultivos celulares

Ubicació Ubicación cromosòmica

Eritropoyetina

EPO

Riñ Riñon

Actù Actùa en la proliferació proliferación y maduraciòn de la lì lìnea eritroide en los estadì estadìos mas maduros

7 q11q11-22

Trombopoyetina

TPO

Riñ Riñòn,

Megacariopoyesis

3q263q26-27

FECFEC-macrofà macrofàgico

FECFECM

M-EndEnd-Fib

Crecimiento de colonias de macròfagos

5q33

FCEFCE-granulo macrofagicas

FECFECGM

T-EndEnd-Fib Macòfagos

Crecimiento de colonias de granulocitos y macròfagos y junto a la EPO permite el crecimiento de colonia multilì multilìneas

5q235q23-31

FECFEC-granulocì granulocìtico

FECFEC-G

M-EndEnd-Fib

Crecimiento de granulocitos neutròfilos

17q2117q21-22

Interlucina1

ILIL-1

Monocitos EndEnd-Fib

Junto con la IL3 coestimula las cè cèlulas primitivas

2q

Interlucina 2

ILIL-2

T

Estimula el crecimiento de las cèlulas T, pero no las mieloides

4q

Interlucina ·3 Burst promotin activity

ILIL-3

T-EndEnd-FibFibmastocitosmastocitosNK

Estimula todas las cè cèlulas comprometidas en una lì lìnea y cèlulas multilí multilínea mieloides

5q235q23-31

Interlucina 4

ILIL-4

T

Coestimula todos los tipos de cèlulas uni y multilí multilíneas mieloide en combinació combinación con otro FEC

5q

Interlucina 5

ILIL-5

T- mastocitos

Estimula la formació formación de colonias eosinòfilas

4q31

Interlucina 6

ILIL-6

T-B-M-FibFibEnd

Coestimula cè cèlula de colonias muy primitivas en colaboració colaboración con IL3

7q

Interlucina 7

ILIL-7

T

Estimula cè cèlulas pre B, pre T y megacariocitos

8q

Interlucina 9

ILIL-9

T

Estimula cel T y progenitores eritroides

Interlucina 11

IL11

C-Kit ligando Fact de Stem Cell Fact del mastocito

cKL

Estimula las cè cèl B, megacariocitos y mastocitos Fib - End

Acciòn sinè sinèrgica de los factores para estimular lì lìneas mù mùltiples

EPO

APOPTOSIS

FACTORES INHIBIDORES Mantienen la masa celular hemotopoyética constante por inhibición de la fase mitótica y previenen la pérdida por apoptosis Los mas importantes son: *MIP-1alfa *TGF-beta *TNF-alfa *PG *Subunidad H de la ferritina

LIBERACIÒN CELULAR Se produce entre las células de la adventicia y a traves de los canales que se desarrollan en las células endoteliales *Factores liberadores: Granulocitos: C-SCF,GM , glucocorticoides y están bajo el control de quimioquinas Reticulocitos:EPO Plaquetas:invaginación de los megacariocitos que pierden un pedazo. Estan regulados por quimioquinas 

CIRCULACIÒN DE HSC  Las Sc

circulan en SP y pueden volver a entrar en la MO  La expresión de L-selectina y CD44 en células CD34+ se correlaciona con un implante mas rápido. Las células de cordón umbilical tienen mayor cantidad de estas sustancias que las del adulto

CIRCULACIÒN DE HSC  La

salida de las SC está regulada por aumento del flujo medular, contracción de las células reticulares adventicias, alteración entre las interacciones adhesivas entre las células CD34 y la matriz,aumento de cèl CD34, gelatinasa B,IL-8, y/o G-CSF y gradiente de las quimioquinas a traves de la barrera sinusoidal

PROGENIE MIELOIDE

MIELOBLASTO

MIELOBLASTO

PROMIELOCITO

MIELOCITO,METAMIELOCITO

MIELOCITO, CAYADO

NEUTROFILOS

LEUCOCITOS *GRANULOCITOS O POLIMORFONUCLEARES: Neutrófilos, eosinófilos , basófilos *MONONUCLEADOS Linfocitos,monocitos

GRANULOCITO NEUTROFILO *SP:4000-4250 cel/mm3 *Tamaño: 12-13um *GRANULOS 1ª,AZUROFILOS ,INESPECIFICOS -Lisosomas 1ª,10 a 20% del contenido granular *Mieloperoxidasa *fosfatasa acida *esterasas *beta glucuronidasa y beta galactosidasa *lisozima *otras proteinas básicas catiónicas

*GRANULOS SECUNDARIOS O ESPECIFICOS Constituyen el 80-90% de los gránulos, son anfóteros ,se tiñen lila o rojizo *Fosfatasa acida *Lactoferrina *Fagocitina *Proteinas cationicas leucocitaria(pirògenos) * Lisozima *NADPH oxidasa *Proteina de uniòn de la B12

*VESICULAS SECRETORIAS: Contienen FAL *GRANULOS GELATINOSOS Gelatinasa, lisozima *Contienen alto contenido de glucógeno citoplasmático

FUNCIONES DEL GN 1-Defensa antimicrobiana: fagocitosis ,bactericidia 2-Síntesis de la Proteina transportadora de B12 3- Síntesis de pirógeno leucocitario 4-Biosíntesis de nucleótidos