U niversidad N acional del N ordeste Facultad de Medicina Maestría en Micología Médica
Bacterias Filamentosas de Interés en Micología
Luis Merino - 2012
• Ampliamente distribuidas en el suelo • Algunos son patógenos de humanos, animales y plantas
Taxonomía Reino Bacteria Philum Actinobacteria Orden Actinomycetales Suborden Streptosporangineae
Actinomycineae
Streptomycineae
Corynebacterineae
Familias Streptosporangiaceae
Actinomycetaceae
Streptomycetaceae
Nocardiaceae
Mycobacteriaceae
Nocardia
Mycobacterium
Géneros Actinomadura
Actinomyces
Streptomyces
Características de los ácidos micólicos
•
Mycobacterium spp: 60-90 carbonos de longitud
•
Corynebacterium spp: 28-40 carbonos de longitud
•
Nocardia spp: 40-56 carbonos de longitud
Micobacterias Gram Negativas
Gram Positivas
Bicapa lipídica Micolato arabinogalactano peptidoglicano lípidos + LPS porinas Lipoarabinomanosa
acil lipidos
Hábitat Natural • Actinomicetales aeróbicos – Las especies de Nocardia y otros actinomicetales aeróbicos son ubicuos en la naturaleza, principalmente en la tierra y participan activamente en la descomposición de los vegetales – Las especies de Streptomyces (>3.000) y Actinomadura se encuentran ampliamente distribuidos en los suelos. – Las micobacterias atípicas se encuentran en el suelo, el agua y animales de sangre fría y caliente.
• Actinomicetales anaeróbicos – Las especies de Actinomyces son colonizantes normales de las membranas mucosas del hombre y los animales: orofaringe, amígdalas, glándulas salivales, árbol traqueobronquial, tracto gastrointestinal, aparato genital femenino.
Modos de infección • Actinomicetales aeróbicos – La infección por Nocardia se adquiere por inhalación o inoculación directa de la piel (traumatismo) con elementos contaminados – Streptomyces y Actinomadura son organismos que infectan por traumatismos, especialmente en los miembros inferiores – Especies de Actinomadura (A. madurae, A. latina, A. pelletieri) producen infecciones subcutáneas en zonas tropicales y subtropicales en personas que caminan descalzos. – Las micobacterias atípicas principalmente las de crecimiento rápido se adquieren por inhalación o ingresan a través de heridas en la piel o prótesis.
• Actinomicetales anaeróbicos – Actinomyces invade tejidos normalmente estériles a partir de las membranas mucosas donde se encuentran colonizando.
Formas de Infección Actinomycetes aeróbicos • Las infecciones por Nocardia se producen generalmente en pacientes immunocomprometidos o aquellos con enfermedad pulmonar anterior – Nocardia asteroides complex son agentes de infección pulmonar • Las complicaciones de la neumonía por Nocardia son la pulmonar (~50%) y absceso cerebral (~30%)
diseminación extra
– N. otitidiscaviarum agente infrecuente de infección sistémica. – N. brasiliensis agente de micetomas cuando se produce la inoculación subcutánea • El micetoma actinomicótico causa destrucción local de los tejidos, incluido el óseo
Formas de Infección Actinomycetes aeróbicos • Las micobacterias atípicas de crecimiento rápido producen granulomas y abscesos, generalmente pulmonares o de piel y partes blandas. • Los más frecuentes son M. fortuitum, M. peregrinum, M. chelonae, M. abscessus y M. fortuitum biovariedad 3. – La coloración de Z-N puede mostrar ovillos de BAAR y con Gram suelen verse como “collar de perlas”
Formas de Infección Actinomycetes aeróbicos • Los Streptomyces (S. anulatus antiguamente S. griseus y S. somaliensis) y Actinomadura son productores de micetomas actinomicóticos, principalmente en zonas cálidas. – Los micetomas por S. somaliensis se localizan con frecuencia en la cabeza y el cuello. – Otras localizaciones frecuentes son los miembros inferiors
Formas de Infección Actinomycetes anaeróbicos • Actinomyces israelii causa actinomicosis en los cuales los granulomas son supurativos. – La actinomicosis cérvico facial es la más común (~60%), seguido por la abdominal (20%) y la pulmonar (15%), en los últimos años han aumentado los casos de endometritis por DIU. • El pus contiene gránulos de aspecto sulfuroso, que son una masa enredada de bacterias ramificadas cuya observación establece diagnóstico.
Diagnóstico
Micetomas actinomicóticos El micetoma es un pseudotumor inflamatorio crónico, localizado, no contagioso que afecta progresivamente tejido cutáneo, subcutáneo y óseo, produciendo deformación y destrucción de los tejidos invadidos
Agentes
Color de los gránulos
Frecuencia
Nocardia asteroides
Blanco
Raro
N. brasiliensis
Blanco
Común
N. otitidiscaviarum
Blanco a amarillo
Raro
Actinomadura madurae
Blanco a amarillo
Común
A. pelletieri
Rojo
Ocasional
Steptomyces somaliensis
Amarillo a café
Ocasional
durante
FLUJO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LOS ACTINOMICETALES MÁS COMÚNMENTE ENCONTRADOS EN MATERIAL CLÍNICO
A) Bacilos Gram positivos delgados, filamentosos o células pleomórficas (menos de 1 mm de diámetro) a menudo en apariencia de cuentas, de tinción irregular. Posible selección: Corynebacterium, Mycobacterium, Nocardia, Actinomyces. B) Bacilos alcohol-ácido-resistentes, filamentos o células pleomórficas (frecuentemente en forma de cuentas). Posible selección: Mycobacterium, Nocardia. C) No alcohol-ácido-resistentes. Posible selección: Corynebacterium, Nocardia, Actinomyces.
FLUJO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LOS ACTINOMICETALES MÁS COMÚNMENTE ENCONTRADOS EN MATERIAL CLÍNICO
D) Crecimiento Aeróbico. Posible selección: Corynebacterium, Mycobacterium, Nocardia. E) Crecimiento Anaeróbico. Posible selección: Actinomyces. F) Células filamentosas de formas ramificadas que fragmentan a bacilos y cocos cuando crecen en todos los medios de laboratorio. Posible selección: Nocardia, Actinomyces. G) Raramente forman filamentos ramificados en la mayoría de los medios de laboratorio Posible selección: Mycobacterium, Corynebacterium.
Identificación • Actinomycetes aeróbicos – Nocardia, Actinomadura y Streptomyces (poco patógenos) son aerobios obligados. – El género Nocardia está formado por bacterias delgadas Gram positivas y Kinyoun positivo. – Nocardia desarrolla en agar sangre, Sabouraud dextrosa sin antibióticos, Lowenstein-Jensen, Middlebrook , thioglicolato, tripticasa soya, agar glicerinado, etc. – El tiempo de crecimiento es entre 3 días hasta 2 semanas a 37ºC, pero también crece a 25ºC. – Es Ureasa positivo. – Para su tipificación se utiliza la descomposición de la caseína, tirosina, xantina e hipoxantina. – Nocardia son parcialmente ácido resistentes en la coloración de Kinyoun (1% H2SO4 como decolorante) – Actinomadura y Streptomyces desarrollan en las mismas condiciones y en el mismo período que Nocardia.
Nocardias
Nocardias
Nocardias
Identificación Lisozima1
Ureasa2
Lactosa
Xilosa
Arabinosa
Nocardia asteroides
+
+
–
–
–
N. brasilensis
+
+
–
–
–
N. otitidiscaviarum
+
+
–
–
–
Streptomyces anulatus
–
+/–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
+
+
+
–
–
–
–
–
S. somaliensis Actinomadura madurae A. pelletieri
–
1 - Resistencia al crecimiento en caldo glicerinado con lizosima 2 - Medio de Christensen
Identificación Caseína
Tirosina
Xantina
Hipoxantina
Nocardia asteroides1
-
-
-
-
N. brasilensis
+
+
-
+
N. otitidiscaviarum
-
-
+
+
Strepomyces anulatus
+
+
+
NI2
S. somaliensis
+
+
-
+
Actinomadura madurae3
+
+
-
+
A. pelletieri3
+
+
-
+
1 - Pruebas de sensibilidad requeridos, N. farcinica presenta característica resistencia a cefotaxima, y resistencia variable a ceftriaxona. 2 - NI = no informado. 3 - A. madura descomposición de la esculina positiva, A. pelletieri descomposición de la esculina negativa.
Porcentaje de susceptibilidad de Nocardia asteroides complex a los antimicrobianos Sul
Cip
Ami
Cef
Ctr
Imi
N. asteroides1
96-99
38-98
100
94-100
94-100
77-98
N. farcinica
89-100
68-88
100
0-7
0-73
64-87
N. nova
89-97
0
100
87-100
100
100
Sul = sulfametoxazol, Cip = ciprofloxacina, Ami = amikacina, Cef = cefotaxima, Ctr = ceftriaxona, Imi = imipenem 1 - Nocardia asteroides sensu stricto tipo VI
Fuente: Sorrell, T.C., Mitchell, D.H., and Iredell, J.R.. Chapter 252. Nocardia species. In Mandell, Douglas, and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases. G.L. Mandell, J.E. Bennett, R. Dolin, Eds. Elsevier Churchill Livinstone, 2005.
Streptomyces
Micobacterias
Micobacterias
Identificación • Actinomycetes anaeróbicos – Actinomyces sp. en cultivos pueden ser microaerófilos o anaerobios estrictos – Actinomyces sp. se identifican mediante pruebas de fermentación e hidrólisis (muy complicadas), pruebas comerciales (rapID, ANAII, API-ZYM) o pruebas moleculares: RLFP, sondas de ADN (Gen-Probe) o PCR y posterior secuenciación.
Actinomyces
Actinomyces
Gracias por su atención
