Universidad Nacional del Nordeste Facultad de Medicina Especialización en Bacteriología Clínica

Bacterias Filamentosas

Luis Merino - 2015

• Ampliamente distribuidas en el suelo • Algunos son patógenos de humanos, animales y plantas

Taxonomía Reino Bacteria Philum Actinobacteria Orden Actinomycetales Suborden Streptosporangineae

Actinomycineae

Streptomycineae

Corynebacterineae

Familias Streptosporangiaceae

Actinomycetaceae

Streptomycetaceae

Nocardiaceae

Mycobacteriaceae

Nocardia

Mycobacterium

Géneros Actinomadura

Actinomyces

Streptomyces

Características de los ácidos micólicos

•

Mycobacterium spp: 60-90 carbonos de longitud

•

Corynebacterium spp: 28-40 carbonos de longitud

•

Nocardia spp: 40-56 carbonos de longitud

Micobacterias Gram Negativas

Gram Positivas

Bicapa lipídica Micolato arabinogalactano peptidoglicano lípidos + LPS porinas Lipoarabinomanosa

acil lipidos

Hábitat Natural • Actinomicetales aeróbicos – Las especies de Nocardia y otros actinomicetales aeróbicos son ubicuos en la naturaleza, principalmente en la tierra y participan activamente en la descomposición de los vegetales – Las especies de Streptomyces (>3.000) y Actinomadura se encuentran ampliamente distribuidos en los suelos. – Las micobacterias atípicas se encuentran en el suelo, el agua y animales de sangre fría y caliente.

• Actinomicetales anaeróbicos – Las especies de Actinomyces son colonizantes normales de las membranas mucosas del hombre y los animales: orofaringe, amígdalas, glándulas salivales, árbol traqueobronquial, tracto gastrointestinal, aparato genital femenino.

Modos de infección • Actinomicetales aeróbicos – La infección por Nocardia se adquiere por inhalación o inoculación directa de la piel (traumatismo) con elementos contaminados – Streptomyces y Actinomadura son organismos que infectan por traumatismos, especialmente en los miembros inferiores – Especies de Actinomadura (A. madurae, A. latina, A. pelletieri) producen infecciones subcutáneas en zonas tropicales y subtropicales en personas que caminan descalzos. – Las micobacterias atípicas principalmente las de crecimiento rápido se adquieren por inhalación o ingresan a través de heridas en la piel o prótesis.

• Actinomicetales anaeróbicos – Actinomyces invade tejidos normalmente estériles a partir de las membranas mucosas donde se encuentran colonizando.

Formas de Infección Actinomycetes aeróbicos • Las infecciones por Nocardia se producen generalmente en pacientes immunocomprometidos o aquellos con enfermedad pulmonar anterior – Nocardia asteroides complex son agentes de infección pulmonar • Las complicaciones de la neumonía por Nocardia son la pulmonar (~50%) y absceso cerebral (~30%)

diseminación extra

– N. otitidiscaviarum agente infrecuente de infección sistémica. – N. brasiliensis agente de micetomas cuando se produce la inoculación subcutánea • El micetoma actinomicótico causa destrucción local de los tejidos, incluido el óseo

Formas de Infección Actinomycetes aeróbicos • Las micobacterias atípicas de crecimiento rápido producen granulomas y abscesos, generalmente pulmonares o de piel y partes blandas. • Los más frecuentes son M. fortuitum, M. peregrinum, M. chelonae, M. abscessus y M. fortuitum biovariedad 3. – La coloración de Z-N puede mostrar ovillos de BAAR y con Gram suelen verse como “collar de perlas”

Formas de Infección Actinomycetes aeróbicos • Los Streptomyces (S. anulatus antiguamente S. griseus y S. somaliensis) y Actinomadura son productores de micetomas actinomicóticos, principalmente en zonas cálidas. – Los micetomas por S. somaliensis se localizan con frecuencia en la cabeza y el cuello. – Otras localizaciones frecuentes son los miembros inferiores

Formas de Infección Actinomycetes anaeróbicos • Actinomyces israelii causa actinomicosis en los cuales los granulomas son supurativos. – La actinomicosis cérvico facial es la más común (~60%), seguido por la abdominal (20%) y la pulmonar (15%), en los últimos años han aumentado los casos de endometritis por DIU. • El pus contiene gránulos de aspecto sulfuroso, que son una masa enredada de bacterias ramificadas cuya observación establece diagnóstico.

Diagnóstico

Micetomas actinomicóticos El micetoma es un pseudotumor inflamatorio crónico, localizado, no contagioso que afecta progresivamente tejido cutáneo, subcutáneo y óseo, produciendo deformación y destrucción de los tejidos invadidos

Agentes

Color de los gránulos

Frecuencia

Nocardia asteroides

Blanco

Raro

N. brasiliensis

Blanco

Común

N. otitidiscaviarum

Blanco a amarillo

Raro

Actinomadura madurae

Blanco a amarillo

Común

A. pelletieri

Rojo

Ocasional

Steptomyces somaliensis

Amarillo a café

Ocasional

durante

FLUJO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LOS ACTINOMICETALES MÁS COMÚNMENTE ENCONTRADOS EN MATERIAL CLÍNICO

A) Bacilos Gram positivos delgados, filamentosos o células pleomórficas (menos de 1 mm de diámetro) a menudo en apariencia de cuentas, de tinción irregular. Posible selección: Corynebacterium, Mycobacterium, Nocardia, Actinomyces. B) Bacilos alcohol-ácido-resistentes, filamentos o células pleomórficas (frecuentemente en forma de cuentas). Posible selección: Mycobacterium, Nocardia. C) No alcohol-ácido-resistentes. Posible selección: Corynebacterium, Nocardia, Actinomyces.

FLUJO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LOS ACTINOMICETALES MÁS COMÚNMENTE ENCONTRADOS EN MATERIAL CLÍNICO

D) Crecimiento Aeróbico. Posible selección: Corynebacterium, Mycobacterium, Nocardia. E) Crecimiento Anaeróbico. Posible selección: Actinomyces. F) Células filamentosas de formas ramificadas que fragmentan a bacilos y cocos cuando crecen en todos los medios de laboratorio. Posible selección: Nocardia, Actinomyces. G) Raramente forman filamentos ramificados en la mayoría de los medios de laboratorio Posible selección: Mycobacterium, Corynebacterium.

Identificación • Actinomycetes aeróbicos – Nocardia, Actinomadura y Streptomyces (poco patógenos) son aerobios obligados. – El género Nocardia está formado por bacterias delgadas Gram positivas y Kinyoun positivo. – Nocardia desarrolla en agar sangre, Sabouraud dextrosa sin antibióticos, Lowenstein-Jensen, Middlebrook , thioglicolato, tripticasa soya, agar glicerinado, etc. – El tiempo de crecimiento es entre 3 días hasta 2 semanas a 37ºC, pero también crece a 25ºC. – Es Ureasa positivo. – Para su tipificación se utiliza la descomposición de la caseína, tirosina, xantina e hipoxantina. – Nocardia son parcialmente ácido resistentes en la coloración de Kinyoun (1% H2SO4 como decolorante) – Actinomadura y Streptomyces desarrollan en las mismas condiciones y en el mismo período que Nocardia.

Nocardias

Nocardias

Nocardias

Identificación Lisozima1

Ureasa2

Lactosa

Xilosa

Arabinosa

Nocardia asteroides

+

+

–

–

–

N. brasilensis

+

+

–

–

–

N. otitidiscaviarum

+

+

–

–

–

Streptomyces anulatus

–

+/–

–

–

–

–

–

–

–

–

–

+

+

+

–

–

–

–

–

S. somaliensis Actinomadura madurae A. pelletieri

–

1 - Resistencia al crecimiento en caldo glicerinado con lizosima 2 - Medio de Christensen

Identificación Caseína

Tirosina

Xantina

Hipoxantina

Nocardia asteroides1

-

-

-

-

N. brasilensis

+

+

-

+

N. otitidiscaviarum

-

-

+

+

Strepomyces anulatus

+

+

+

NI2

S. somaliensis

+

+

-

+

Actinomadura madurae3

+

+

-

+

A. pelletieri3

+

+

-

+

1 - Pruebas de sensibilidad requeridos, N. farcinica presenta característica resistencia a cefotaxima, y resistencia variable a ceftriaxona. 2 - NI = no informado. 3 - A. madura descomposición de la esculina positiva, A. pelletieri descomposición de la esculina negativa.

Porcentaje de susceptibilidad de Nocardia asteroides complex a los antimicrobianos Sul

Cip

Ami

Cef

Ctr

Imi

N. asteroides1

96-99

38-98

100

94-100

94-100

77-98

N. farcinica

89-100

68-88

100

0-7

0-73

64-87

N. nova

89-97

0

100

87-100

100

100

Sul = sulfametoxazol, Cip = ciprofloxacina, Ami = amikacina, Cef = cefotaxima, Ctr = ceftriaxona, Imi = imipenem 1 - Nocardia asteroides sensu stricto tipo VI

Fuente: Sorrell, T.C., Mitchell, D.H., and Iredell, J.R.. Chapter 252. Nocardia species. In Mandell, Douglas, and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases. G.L. Mandell, J.E. Bennett, R. Dolin, Eds. Elsevier Churchill Livinstone, 2005.

Streptomyces

Micobacterias

Micobacterias

Identificación • Actinomycetes anaeróbicos – Actinomyces sp. en cultivos pueden ser microaerófilos o anaerobios estrictos – Actinomyces sp. se identifican mediante pruebas de fermentación e hidrólisis (muy complicadas), pruebas comerciales (rapID, ANAII, API-ZYM) o pruebas moleculares: RLFP, sondas de ADN (Gen-Probe) o PCR y posterior secuenciación.

Actinomyces

Actinomyces

Gracias por su atención