Tribuna Por Dale Grinstead, asesor técnico del departamento de microbiología de diversey

Cómo afecta la resistencia microbiológica a la efectividad de los desinfectantes La resistencia es la capacidad de un microorganismo para mostrar una sensibilidad reducida a un tratamiento antimicrobiano que sería eficaz contra otros organismos. Existen varios tipos de resistencia, incluida la resistencia intrínseca, la resistencia adquirida fenotípicamente y la resistencia adquirida genéticamente. Resistencia intrínseca La resistencia intrínseca es la capacidad de un organismo para ser insensible a una condición antimicrobiana debido a la naturaleza del microorganismo. Por ejemplo, algunos microorganismos pueden formar esporas bacterianas que les permiten sobrevivir en condiciones como temperaturas extremas y secado, así como la exposición a muchos desinfectantes. En particular, los antimicrobianos no oxidantes como los compuestos fenólicos, el alcohol y el cloruro de amonio cuaternario (QAC) no pueden penetrar un recubrimiento de esporas. Y con los biocidas oxidantes, generalmente se necesitan niveles mucho más altos y tiempos de exposición para inactivar una espora en comparación con un microorganismo normal. Por ejemplo, puede tomar 5.000 partes por millón (ppm) y varios minutos o más para inactivar una espora en comparación con solo 50 ppm de cloro y 30 segundos. Las micobacterias muestran otra forma de resistencia intrínseca, que tiene una pared celular que es muy hidrófoba y contiene mucha cera natural. Esto puede evitar que muchos biocidas, especialmente biocidas no oxidantes, penetren en la pared celular. Esta barrera se puede superar, pero requiere un mayor nivel de biocida, mayor tiempo de exposición o el uso de otros ingredientes. La resistencia intrínseca es generalmente un rasgo muy estable y está estrechamente vinculada a la estructura básica de varios microorganismos. En general, la re-

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sistencia intrínseca de los microorganismos a los biocidas es, desde la más resistente a la menos resistente: esporas> micobacterias> virus sin envoltura> bacterias gram negativas> bacterias gram positivas> virus envueltos. Resistencia fenotípica La capacidad de los microorganismos para volverse insensibles a un tratamiento antimicrobiano como resultado de cómo y dónde crece el organismo se considera resistencia adquirida fenotípicamente. Un ejemplo son los biofilms, comunidades complejas de microorganismos como bacterias, levaduras, mohos, protozoos y virus. Los biofilms se adhieren a las superficies y secretan un material que fortalece y protege la biopelícula. Los organismos que viven en un biofilm son mucho más resistentes a los agentes antimicrobianos que los organismos que están libremente en suspensión. Esta mayor resistencia se produce porque los agentes antimicrobianos no pueden llegar físicamente a los microorganismos a través del material secretado o son inactivados por el material. Los organismos que están en una super-

ficie sucia o incluso en una solución con una carga pesada de suelo a menudo son muy resistentes a los biocidas. Al igual que con los biofilms, esto se debe a que el biocida ha sido inactivado por el suelo o se ha impedido físicamente que llegue al organismo. Resistencia Adquirida genéticamente La resistencia adquirida genéticamente es insensible a un biocida, ya que el microorganismo vence al biocida al transformarse a través de una mutación o mediante la transferencia de genes de resistencia de un organismo a otro. Una mutación es un cambio en el ADN de un organismo y, en raras ocasiones, puede hacer que un microorganismo sea resistente a los biocidas. La exposición a antimicrobianos a niveles submúltiples a lo largo del tiempo puede fomentar este tipo de mutación. Por lo tanto, es fundamental que todos los desinfectantes se usen en las concentraciones recomendadas y de la manera recomendada. También es importante que los biocidas se drenen adecuadamente. Las soluciones agrupadas o permanentes de antimicrobianos que se

diluyen por debajo de los niveles letales aumentan las posibilidades de que se desarrolle un mutante resistente a ese biocida. Los organismos también pueden adquirir una resistencia genética a un biocida mediante la adquisición de un gen de resistencia de otro microorganismo. Existen diferentes modos de transferencia, pero el resultado final es que un organismo que previamente era sensible a un biocida puede adquirir repentinamente los genes que lo hacen resistente al biocida o incluso a múltiples agentes antimicrobianos. A menudo, este tipo de resistencia no es estable. Un gen de mutación o resistencia solo puede ofrecer una ventaja de supervivencia siempre que el biocida esté presente. Por ejemplo, una mutación en un sitio de unión que hace menos probable que un biocida de amonio cuaternario (QAC) pueda unirse a un microorganismo también puede interferir con la unión de nutrientes que son importantes para que la célula sobreviva. Entonces, mientras el QAC está presente, la mutación actúa como una ventaja de supervivencia, pero una vez que se elimina el QAC, el mutante aún no puede absorber nutrientes fácilmente y puede desaparecer de una población una vez que el biocida se ha ido. El impacto de la resistencia Muchas personas se preocupan por la resistencia adquirida genéticamente a los desinfectantes, pero ésta es una de las formas menos relevantes. La confusión puede ser el resultado de la preocupación legítima sobre la resistencia adquirida genéticamente a los antibióticos. Sin embargo, los antibióticos y los biocidas son compuestos totalmente diferentes. Los antibióticos a menudo tienen un único sitio de unión en un microorganismo objetivo y un solo sitio en el que están activos. También se usan en niveles que están muy cerca del nivel más bajo posible en el que el antimicrobiano es efectivo, conocido como la concentración mínima inhibitoria (MIC). Eso significa que una mutación en un único sitio de unión o sitio activo en un microorganismo puede hacer que ese organismo sea casi inmune a un antibiótico, particularmente si el antibiótico se usa a niveles cercanos a su CIM.Sin embargo, los biocidas tienen muchas formas en que pueden matar microorganismos. En algunos casos, puede haber cientos o incluso miles de sitios o lugares de unión en una célula bacteriana donde el biocida está activo. Incluso si una célula muta para que un sitio en su superficie ya no se una a un biocida, puede tener un efecto muy limitado sobre la efectividad del biocida.

La capacidad de los microorganismos para volverse insensibles a un tratamiento antimicrobiano como resultado del lugar donde crece el organismo se denomina resistencia adquirida fenotípicamente. El ejemplo más característico son los biofilms.

Los microorganismos que han desarrollado resistencia adquirida genéticamente son insensibles a los biocidas debido a las mutaciones que ha sufrido su ADN. Usar los desinfectantes sin seguir las concentraciones recomendadas aumentan las posibilidades de que se desarrollen mutaciones resistente a ese biocida.

Otro factor a considerar son los niveles de uso. A menudo se usa un desinfectante en el MIC para ese antimicrobiano. Por ejemplo, el MIC para un QAC típico contra muchos organismos es de 0.5-2 ppm. Un organismo que adquiera resistencia a un QAC puede tolerar de 2 a 5 veces ese QAC para sobrevivir de 1 a 10 ppm. Sin embargo, el QAC se usa a 200-800 ppm en muchas aplicaciones, por lo que este nivel de resistencia realmente tiene poco o ningún efecto. La resistencia intrínseca tampoco es una resistencia particularmente relevante, siempre que se tenga cuidado al seleccionar desinfectantes. Debido a que esta característica es estable y es inherente a la naturaleza de los microorganismos diana, la eficacia de un antimicrobiano puede probarse contra el microorganismo y la etiqueta del antimicrobiano indicará qué microorganismos es eficaz contra el tratamiento.

A menudo, la forma más grave de resistencia es la resistencia adquirida fenotípicamente, o los organismos que crecen en los biofilms o los que están protegidos por el suelo. El paso más importante para controlar este tipo de organismos son las buenas prácticas de limpieza. Sin embargo, cuando hay un problema microbiano, muchas personas cambian los desinfectantes en el supuesto de que los organismos han adquirido una resistencia genética o utilizan los desinfectantes a concentraciones superiores a las recomendadas. Desafortunadamente, debido a que la mayoría de los desinfectantes son productos de limpieza deficientes y debido a que a menudo se impide que los productos químicos entren en contacto físico con los microorganismos en los biofilms o en el suelo, tales respuestas son ineficaces. La respuesta correcta a este tipo de resistencia es limpiar mejor.

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