Tecnología Coulter CVS

 

Flow Cell

La muestra una vez tratada es dirigida a una celda de flujo (Flow cell) en la cual por el diseño hidrodinámico, los leucocitos se alinean y pasan formados uno a uno y en donde se realizan las siguientes mediciones

Volumen  Mediante impedancia de baja frecuencia se determina el volumen de la célula 

Conductividad  La conductividad de alta frecuencia de Radiofrecuencia (RF) determina la conductividad interna de la célula 

Scatter  La dispersión (scatter) de luz láser indica la estructura y forma de la célula 





  

De esta manera son realizadas las 3 determinaciones de manera simultánea Las lecturas de estas 3 señales análogas es enviadas al analizador para su amplificación y proceso, luego el sistema genera 3 gráficos DF1: Volumen vs. Scatter DF2: Volumen vs. Conductividad DF3: Volumen vs. Conductividad extrayendo las señales de Neutrófilos y Eosinófilos



DF1: Volumen vs. Scatter

DFA

DF2

El sistema caracteriza cada célula que pasa hasta completar un conteo de 8.132 células o partículas que sobrepasen un cierto volumen o bien hasta que transcurran 20 segundos, cualquiera de las 2 situaciones que ocurra primero.

Informe del coulter maxim

Informe del Cell Dyn 3500

Sysmex XS-1000i

Sysmex XS-1000i Características Principales 

21 Parámetros, Diferencial Leucocitario de 5 partes 

Manejo de Datos sobre Windows XP® Professional



Registro de 10.000 resultados de pacientes (numéricos y gráficos)



Control de Calidad Interno y Externo



Análisis de WBC por Citometría de Flujo Fluorescente



Enfoque Hidrodinámico para recuento de RBC y PLT



Análisis de Hemoglobina libre de cianuro

Mínimo Volumen de aspiración  20 ul en tubos con EDTA * Mínimo volumen de muestra requerido 

Volumen muerto •

Modo manual – 500 µL

•

Modo automuestreador – 1ml

•

Modo capilar – 140µL

Sysmex XS-1000i Beneficios para el Usuario Validación de los resultados de las muestras



Con sólo un “clic” pueden verse los resultados y validar

Parámetros 

WBC, RBC, Hgb, Hct, MCV, MCH, MCHC, PLT



RDW-CV, RDW-SD, HDW



Neut%, Lymph%, Mono%, Eo%, Baso%, NRBC%



MPV



Retic%, Retic#, IRF



IG%, IG#

Linealidad extendida

0 – 400 x 103/ µL

HGB

0 – 25,0 g/ dL

0 – 8,00 x 106/ µL

HCT

0 – 60%

0 – 5.000 x 106/ µL

Tecnología para Glóbulos rojos y Plaquetas Método de Electroenfoque Hidrodinámico Es el standard usado por Sysmex en los instrumentos de la serie X para la determinación de conteos precisos de plaquetas y glóbulos rojos Las células son rodeadas por una capa de fluído que las guía una por una a través del centro de la apertura Cada célula es contada y medida individualmente Un segundo flujo de fluído en la parte posterior de la apertura asegura que las células no recirculen

Tecnología para Hemoglobina Reactivo libre de cianuro    

Grupo hidrofílico del SLS que se une a la molécula de la globulina Ocurre un cambio de configuración Oxidación de Fe 2+ --> Fe 3+ Grupos Hidrofílicos de SLS se unen a Fe --> SLS-Hb

Fe 3+

Fe 2+

SLS

Fe 3+

Sysmex XS-1000i Tecnología  El XS utiliza el mismo

método para la medición exacta de RBC/HTO que los otros analizadores de la familia X El hematocrito es medido basado en el volumen de las células rojas determinado por detección de CD 

Principios de medición 







Citometría de flujo usando un láser semiconductor para medir: luz dispersa frontal  volumen celular luz dispersa lateral  estructura interna de la célula fluorescencia lateral  (Tinción de ADN y ARN)

Side scater

Fluorescencia

Foward scater

Sysmex XS-1000i Tecnología 

Citometría de Flujo Fluorescente  Diferencial completa de los leucocitos

Por Citometría de Flujo se obtiene información acerca de la composición y madurez celular Fluorescencia

Información del contenido de RNA y DNA Dispersión lateral

Láser

Información de la estructura interna

Dispersión frontal

Tamaño de la célula

Sysmex XS-1000i Tecnología

Sysmex XS-1000i Beneficios para el usuario Opción de selección de análisis para maximizar el flujo de análisis y los costos operacionales

Modo CBC

Modo CBC + DIFF

Análisis de luz desviada frontal Análisis de luz desviada lateral y de la fluorescencia lateral

+

+

Desarrollo de nuevos softwares Masters

La tecnología que se utiliza es muy potente y brinda más y más posibilidades de medición. Las aplicaciones se desarrollan para cuantificar lo que aparece en los gráficos a partir de utilizar fluorescencia.

X PRO

Es el soft básico, sobre el que se montan las aplicaciones Informe a medida del usuario Rangos para Control de Calidad Medidor para reactivos y seguimiento de trazabilidad

IG Master

Para cuantificar gránulos inmaduros

RET Master

Para cuantificar Hb en Reticulocitos

Cuantificación de Gránulos Inmaduros Información útil sobre el diferencial extendido de leucocitos 

IG: promielocitos mielocitos metamielocitos

maduración de neutrófilos Blastos

promielo mielo

IG

metamielo

bandas

segmentos

fluorescencia

Cuantificación de Gránulos Inmaduros IG Master Canal del diferencial

IG % , #

Normal

Dispersión lateral

RBC 분석 High angle detector (5o - 15o) 670nm Laser Diode

Low angle detector (2o-3o)

RBC Cytogram and Histograms

Macro

RBC Volume (fL)

0

60 120 RBC Volume (V)

200 fL

120fL

0 60fL 28g/dL

28 41 50 g/dL Hgb Concentration (HC)

41g/dL

Micro

Hypo Hyper Hgb Concentration (g/dL) 0

100 pg Hgb Content (CH)

Medida de los eritroblastos

Recuentos de Reticulocitos Método de Referencia: Azul de Metileno Variación entre observadores Altos coeficientes de variación Laboriosos  Métodos automatizados Azul de metileno Fluorescentes 

Canal reticulocitos - Fluorescente RETSEARCH II (Diluyente + Colorante)

WBC

RET

Tinción: Polimetino: ARN Oxazina: ADN Fl muy alta

Fl alta

RBC Fl baja

Canal de los reticulocitos

.. .

Utilidad Clínica - FIR Confirmación de Anemia Aplástica Permite la clasificación de anemias por su capacidad eritropoyética

.. .

Talasemia vs. deficiencia de Hierro Anemia de los procesos crónicos Hipoproducción vs. respuesta eritroide temprana

Detección de implante correcto luego de transplante

Utilidad Clínica

.. .. . .

Monitoreo de tratamientos inmunosupresores Monitoreo terapéutico de: tratamientos con Eritropoyetina Corrección de anemias nutricionales Tratamiento de Mielodisplasias

Definición de necesidad de transfusión en neonatos Evolución post-tte 60 40

GB

20

Reti (%)

0

IRF (%) -10

-4

-2

2

5

días post-tte

8

15

HPC (%)

Nuevos parámetros Recuento automatizado de granulocitos inmaduros IG  Recuento de plaquetas inmaduras IPF  Contenido de Hb de los reticulocitos 

Plaquetas Reticuladas 





Son mas densas y reactivas que las plq maduras El contenido de RNA está relacionado con la megacariopoyesis Reflejan la actividad de la trombopoyesis

Determinacion de las plaquetas inmaduras

Contenido de Hb de los reticulocitos Ret-He Reticulocitos con contenido de Hb