Componentes de la sangre

Determinación del Hematocrito

Cámara de recuento globular (Neubauer)

Automatización en Hematología Exactitud  Precisión  Rapidez  Standarización  Screening 

Toma de muestra Procesamiento Sangre entera(EDTA)  Procesamiento dentro de las 8 hs  Conservar refrigerada  Temperatura ambiente 

Principios de Medición 

Impedancia Eléctrica

Citometria de Flujo  Dispersión óptica  Fluorescencia  Peroxidasa 



Espectrometria de Absorción

Impedancia Volumétrica  

N° Pulsos :proporcional al N° de células Amplitud del pulso :proporcional al tamaño de la célula

Recuento por impedancia 



Los impulsos electricos generados por RBC y Plaquetas son contabilizadas y clasificadas CLASIFICACION DE LOS IMPULSOS ELECTRICOS GENERADOS POR RBC Y PLT.



Los impulsos electricos provenientes del RBC’s son agrupados en un histograma con 256 canales de 1 fl de ancho

Histogramas Tres Diff

Conteo por impedancia de GR y Plaq

Indices Hematimétricos VCM  HCM  CHCM  RDW-CV  RDW-SD 

Definición Del CHCM y HCM 





CHCM:Refleja la proporción entre la hemoglobina y el hematocrito de una muestra de sangre Se refiere a la concentraciòn de Hb en el GR promedio,es decir la relacion entre el peso y el volumen que lo contiene HCM: Se refiere al peso de la Hb del GR promedio

¿Qué significa RDW? “RDW – Ancho de la distribución de la curva de los eritrocitos ”



Dos fórmulas matemáticas usadas para describir la variación de tamaño de los eritrocitos (Anisocitosis).

RDW-CV 

Definición: Es el coeficiente de variación alrededor de la media (X) correspondiente a la curva de distribución del volumen de los glóbulos rojos

RDW-SD 

Definición: Medida directa (en fl.) del ancho de la curva de los glóbulos rojos (RBC) Tomada 20% arriba de la línea base



El ancho es medido al 20% de la altura relativa. A esta altura es donde se encuentra la mayor variación de tamaños de las células

ADE :DSx 100/VCM

RDW-SD Altura relativa

Histograma de Eritrocitos La curva más ancha Representa a la población Con mayor anisocitosis

20% Tamaño de los Eritrocitos en fl

Histogramas de plaquetas

FACTORES QUE PRODUCEN INTERFERENCIA FACTORES

PARÀMETRO AFECTADO

Crioaglutinina

GR ,VCM ,CHCM

Aglutinaciòn de GR

Lipemia ,ictericia ,quilomicrones

Hb

La turbidez afecta la lectura espectrofotomètrica

HbCM

Hemòlisis

GR , Hto

Gr lisados y no contados

GR resistentes a la lisis con Hb anormales

GB , Hb

Gr (Hb : S,C,F) no pueden lisarse y se cuentan como GB

Microcitosis o esquistocitos

GR

El tamaño eritrocitario < que el umbral

GR nucleados ,fragmento de Megacariocitos

GB

Se cuentan como GB

…OTRAS CAUSAS DE ERROR EN LOS PARÀMETROS ERITROCITARIOS :     

Crioglobulinas,criofibrinogeno: GR Y Hto Hiperbilirrubinemia y Hiperlipemia : Hb Proteinas plasmàticas anormales y crioglobulinas : Hb Muestras coaguladas : GR Y Hto Microagregados : Hb

Conteo por impedancia :WBC 3 diff 

Los impulsos eléctricos son detectados,clasificados y almacenados en un histograma con canales de 1 fl

Alerta LIM R0. Presencia de NRBC Eritrocitos con lisado incompleto. Crioglobulinas. Coagulación parcial.

Alerta LIM R1. Linfoblastos. Linfocitos atípicos. Crioglobulinas. Coagulación parcial. Linfopenia. Granulocitosis.

Alerta LIM R2.Alerta MID R2. Linfoblastos. Blastos. Monocitosis. Basofilia. Basofilia. Eosinofilia. Eosinofilia. Granulocitosis. Granulocitosis. Linfopenia

. Alerta MID R3. Monocitosis. Eosinofilia. Granulocitosis. Neutrofilos en banda.

Alerta GRAN R3 Alerta GRAN R4 Granulocitosis. Neutropenia. Linfocitosis. Granulocitos inmaduros/Banda

Granulocitosis. Neutropenia. Linfocitosis. Granulocitos inmaduros/Banda

Reporte por impedancia de un caso clinico

Informe MIYTIC 18

Determinación de Hb Se realiza la lectura en la celda de Hb a 540nm  El valor de absorvancia se interpola en la curva de calibración almacenada en el instrumento 

Descripción del Cell Dyn 3200     

Tecnología óptica :PLT,WBC;RBC Tecnología diferencial MAPSS 3D MCV Conteo NOC Reticulocitos

Software y terminal de datos

Reactivos :Cell Dyn    

 

  

Reactivo para la Hb libre de cianuro(NOC) Reduce los riesgos Reduce la interferencia en las muestras con leucocitos marcados Se usa para destruir las membranas de los GB a fin de permitir el conteo WBC(NOC) Reactivo WBC(WOC) Efectúa rápidamente la lisis de los GR y mejora la discriminación de los leucocitos en las poblaciones Diluyente RBC/PLQ DIL Minimiza los efectos de los efectos abrasivos Facilita el enfoque hidrodinámico

Reticulocitos       

Nuevo procedimiento con azul de metileno Tubos ya preparado Muestra de 20ul Tinción de ARN de 15´ Aspirado de la muestra a modo abierto Modo reticular por separado El valor RBC se incorpora automáticamente en el cálculo

Reticulocitos  



ARN polirribosomal Absorbe el nuevo tinte de azul de metileno dentro del reticulocito Estas células se identifican por medio de la dispersión laser a 90° se contabilizan y su tamaño se determina por medio de la tecnología MAPSS(de dispersión múltiple con separación de ángulo polarizado

Tecnología óptica Cell Dyn 3200         

Conteo de WBC y diferencial Conteo óptico(0,10,90,90D) MAPSS Análisis en el modo de lista Conteo de RBC Conteo óptico(0,90) Formación de esferoides Conteo de Plaquetas Conteo óptico(0,10)

Enfoque analítico  



Iluminado por medio de un laser helio neón Enfocado hidrodinámicamente a traves de una celda de flujo de diseño especial Medición de las carácteristicas de dispersión óptica de la luz para las celdas individuales

Enfoque hidrodinámico 







Minimiza la acumulación de proteinas Elimina la circulación retrograda Reduce la irregularidad de la altura de pulso Reduce la perdida por pasaje coincidente

Citometria de Flujo MAPSS

Separación en dispersión polarizada en angulos múltiples



El citograma MAPSS final muestra los eventos de celdas individuales los cuales se definen por medio del uso del color

Formación de esferoides isovolumétricos

Indice de Refracción multivariante MCV-3D

Detección de los RBC resistentes a la hemólisis

Conteo óptico nucleado NOC

Análisis óptico de las plaquetas 



Por medio del uso de un enfoque de dispersión óptica de la luz con ángulo dual se logra una buena separación de los GR y las plq Ademas , la presencia de los cúmulos de plq se puede detectar en forma confiable