Revista Computadorizada de Producción Porcina Contaminación del semen porcino/Contamination of boar semen

Volumen 20 (número 3) 2013

UNA RESENA CORTA SOBRE LA CONTAMINACIÓN MICROBIOLOGICA DEL SEMEN PORCINO Y SUS CONSECUENCIAS

M.J. Acosta

Instituto de Investigaciones Porcinas, Gaveta Postal No. 1. Punta Brava, La Habana, Cuba email:[email protected]

RESUMEN

El examen microbiológico de los eyaculados de cerdos permite establecer un diagnóstico certero acerca de los problemas relacionados con la disminución del periodo de conservación del semen diluido. La eficiencia de las medidas de higiene durante la extracción y la manipulación en los laboratorios de inseminación artificial está relacionada con el índice de contaminación de los eyaculados de cerdos.. En esta reseña se describen los orígenes de la contaminación del semen porcino así, como los principales microorganismos que la producen, las consecuencias que pueden ser derivadas por su presencia, las medidas fundamentales que se deben tener en cuenta para su control además, algunas de las enfermedades trasmitidas a través del mismo. Pudiera afirmarse de manera conclusiva que el semen proveniente de sementales con un correcto estatus sanitario, es segregado sin la presencia de microorganismos, pero puede contaminarse con bacterias que se encuentran en el tracto genito urinario o durante el proceso de extracción. La contaminación de cualquier origen puede disminuir la calidad del semen y afectar los resultados de fertilidad. Palabras claves: semen, verracos, contaminación, microbiología Título corto: Contaminación del semen porcino

A SHORT REVIEW OF MICROBIOLOGICAL CONTAMINATION OF BOAR SEMEN AND ITS CONSEQUENCES

SUMMARY

Microbiological examination of boar ejaculate allows an accurate diagnosis of problems related to decreased shelf life of diluted semen. The efficiency of hygiene measures during collection and manipulation in laboratories of artificial insemination is related to the level of contamination of the pig ejaculate. This review describes the origins of the contamination of pig semen as well as those microorganisms causing it, those consequences which can be derived from their presence, the key actions to be taken into account for a proper, improved control, and some diseases transmitted through microbiological contamination. In conclusions, it could be said that sire semen, is secreted without the presence of microorganisms when an adequate health status is kept, but nevertheless contamination does occur during the extraction process with inhabitant bacteria of the genito-urinary tract. Fertility may be affected when pollution of any origin does decrease semen quality. Key words: semen, boars, contamination, microbiology Short title: Contamination of boar semen

125

Revista Computadorizada de Producción Porcina Contaminación del semen porcino/Contamination of boar semen

Volumen 20 (número 3) 2013

Tabla de contenido Introducción, 126 Origen de la contaminación del semen porcino, 126 Consecuencias de la contaminación del semen porcino, 127 Control de la contaminación, 129 Control higiénico y sanitario, 129 Medidas para el control higiénico y sanitario, 130 Envío de muestras, 130 Conclusiones, 130 Agradecimientos, 131 Referencias, 131

INTRODUCCION La inseminación artificial, como biotecnología reproductiva, gana cada día más prestigio debido a su contribución a la mejora y selección animal. Tal es así, que algunos investigadores han estimado que de los 72 millones de cerdas presentes en el mundo, más del 25% son cubiertas gracias a esta tecnología (De Cuadro 2000; Del Toro et al 2001). No obstante este crecimiento, debe tenerse en cuenta que toda técnica que es aplicada a gran escala en una población animal, está sujeta a ciertos riesgos de tipo sanitario si no se toman un conjunto de medidas profilácticas. En los últimos años se le ha dado mucha importancia a la calidad higiénica sanitaria del semen (Thibier y Guerin 2000; Higuera 2003; Sala et al 2008), pues se conoce que numerosos agentes patógenos, bacterianos o virales, pueden estar presentes en el mismo, porque provienen del aparato urogenital de los sementales o se encuentran en el medio donde están alojados dichos machos. En estudios realizados en Francia por Le Coz (2006), se comprobó que la utilización de semen de verracos, provenientes de un centro de inseminación artificial, con un status sanitario convencional sobre cerdas sin problemas sanitarios, originó manifestaciones clínicas 24 horas después o de haber practicado la inseminación artificial (fiebre>40.5 C, anorexia y repetición de celo). El examen bacteriológico del semen reveló la presencia de Serratia, patógeno oportunista resistente al antibiótico utilizado en ese laboratorio. Este género de bacteria ha sido hallado en otros tipos de infecciones por Hume y Willcox (2004). No debe olvidarse que la base de los buenos resultados de fertilidad de un centro de inseminación es la calidad seminal de las dosis que produce. El examen microbiológico del semen permite establecer un diagnóstico certero acerca de los problemas relacionados con la disminución del período de conservación del semen diluido (Anónimo 2004), permite además monitorear la eficiencia de las medidas de higiene, durante la extracción y la manipulación en el propio laboratorio de procesamiento de semen. También es de mucha utilidad en granjas porcinas, con gran incidencia de retorno al celo, acompañado de descargas vaginales y falta de higiene durante el proceso de inseminación artificial. Tomando en cuenta estas consideraciones Barrera y Buxadé (2007) han afirmado que la contaminación de los eyaculados es un hecho. Esta puede comprometer su utilización en la inseminación artificial o puede inducir un proceso infeccioso en las hembras cubiertas

y disminuir el comportamiento reproductivo, fertilidad y prolificidad, de las granjas (Martín Rillo et al 1999). Esta reseña tiene como propósito describir los principales microorganismos que se pueden encontrar en el semen porcino, las consecuencias que pueden ser derivadas por su presencia y las medidas fundamentales que se deben tener en cuenta para su control.

ORIGEN DE LA CONTAMINACIÓN DEL SEMEN PORCINO Los testículos y las glándulas sexuales accesorias de los verracos sanos están libres de bacterias. Sin embargo, los genitales externos transportan diferentes microorganismos. Y aunque la mayoría de ellos son parte de la microflora normal, también existen bacterias oportunistas o patógenos condicionales, capaces de producir infecciones genitales en hembras susceptibles y disminuir la sobrevivencia y capacidad fecundante de las células espermáticas (Sone 1990; Althouse 1999; Aurich 2005). Se conoce que existen varias fuentes de contaminación, dentro de ellas las mas importantes son el divertículo prepucial, las heces fecales, la piel del verraco, el aire expirado, el personal que colecta el semen, el equipo de colección, el maniquí, el diluyente o agua, equipos y utensilios de laboratorio en sentido general (Serrano et al 1994; Serrano 1995; Serra 2005). Por tal motivo es necesario que un programa de bioseguridad destinado a un laboratorio de inseminación artificial considere todas estas posibles fuentes de contaminación y las maneje bajo estrictas precauciones higiénicas (Simmel 2000). Identificar, los puntos de riesgos, donde los eyaculados pueden contaminarse y establecer un monitoreo sistemático, pudiera resultar de un valor incalculable. Estos puntos son los distintos lugares o fases del proceso de producción de las dosis seminales. Arlegui (2006) resumió como puntos de riesgo relacionados con el verraco; la recogida de la fracción pobre y de los primeros fluidos, el pene inclinado y el prepucio sin limpiar ni secar así como los pelos del prepucio sin cortar y las patologías del verraco como orquitis, cistitis, uretritis, u otras enfermedades sistémicas. Relacionadas con el proceso de muestreo o procesamiento de las muestras de semen, se señalaron las deficiencias en la limpieza de manos o utilización de la técnica de un solo guante, la utilización de material reciclable sin limpiar ni esterilizar correctamente, los

126

Revista Computadorizada de Producción Porcina Contaminación del semen porcino/Contamination of boar semen

fregaderos sucios y sin limpiar diariamente así como el deterioro de la limpieza en todas las áreas del laboratorio, no cambiar el agua del baño de Maria (mínimo, una vez/semana) y no desinfectarlo, el contacto con material fecal, los humanos portadores de determinada flora cutánea así, como otros puntos de riesgo entre ellos el agua de bebida sin clorar, agua destilada, alimentos y aire contaminados así como, sistemas de ventilación deficientes.

Volumen 20 (número 3) 2013

No solamente el origen de la contaminación del semen es importante, se debe prestar especial atención también a las enfermedades que este puede vehiculizar. En estudios realizados en Francia se han identificado un número considerable de enfermedades que pueden ser trasmitidas a través del semen, en la tabla1 se describen algunas de ellas.

Tabla 1. Enfermedades transmisibles a través del semen Semen Prepucio Orina o heces Brucella Aujeszky Peste porcina clásica PRRS Micoplasmas Leptospiras Aujeszky Bacterias diversas Parvovirus Fiebre aftosa Gastroenteritis Peste porcina africana transmisible Enterovirus Salmonella Fuente de los datos: Le Coz (2006)

Ambiente Bordetella Actinobacillus spp Pasteurella Influenza porcina Enterovirus

Como se puede observa, existen disímiles vías o fuentes por las cuales los eyaculados porcinos pueden ser contaminados. También existe un grupo importante de enfermedades que pueden ser trasmitidas a través del semen. Sobre la base de estas consideraciones, se puede sugerir que los programas de bioseguridad, destinados a los centros de procesamiento de semen porcino, deben estar orientados hacia la creación de un fuerte control higiénico del proceso productivo y un eficiente manejo sanitario de los sementales.

metabolitos ácidos, aglutinación, disminución del número de espermatozoides vivos, disminución de la motilidad así como, otras patologías asociadas a la reproducción como la metritis en las cerdas y la disminución de la fertilidad.

CONSECUENCIAS DE LA CONTAMINACIÓN DEL SEMEN PORCINO

Se ha demostrado con anterioridad, el efecto aglutinante y espermicida de la hipomotilidad que provoca la presencia de Pseudomonas (Martínez et al 1984; Tansuli et al 1984; Sone 1990; Monga y Roberts 1994; Kuster y Althouse 1997; Mirjyn 1999) con afectaciones en la fecundación, debido a una alta mortalidad embrionaria (Tapia y Córdova 2007). La flora seminal puede ser banal o potencialmente patógena; debido a esto, ciertas bacterias presentan una importancia mayor por las manifestaciones clínicas asociadas con su presencia. La Brucella suis, responsable de orquitis en el verraco, con una acción directa sobre los espermatozoides es un ejemplo de microorganismo potencialmente patógeno (Althouse y Lu 2005). En estudios realizados en México se reveló la presencia de diferentes géneros de bacterias, que son expuestas en las tablas 2 y 3. En este caso se clasificaron según la frecuencia de aparición.

Muchos investigadores han comprobado que la contaminación bacteriana del eyaculado porcino es inevitable y que el número de estas en el eyaculado puede variar de menos de 1 000/mL a más de 100 000/mL (Martínez et al 1983, 87, 92). Se considera anormal cuando el conteo de bacterias excede las 10 000/mL ó cuando una bacteria específica logra sobrevivir en el semen (Althouse y Lu 2005). Se ha escrito también que una alta presión de infección contaminando al semen puede matar o producir un número variado de patologías espermáticas (Johnson et al 2000; Flowers 2005). A este respecto, Le Coz (2006), ha informado que a partir de 10 000 colonias/mL se producen modificaciones del medio,

En estudios realizados en Perú por Conza et al (2009) se halló que el 60% de los eyaculados contenían una carga bacteriana que sobrepasó las 5 013 ufc/mL, límite permitido por la OIE (2007) y debido a ésto se obtuvieron resultados de fertilidad bajos, en las granjas objetos de estudio.

1

Tabla 2. Bacterias encontradas frecuentement en el semen porcino Entidad Sitio Consecuencias Staphylococcus aureus Tracto reproductor del Lesiones en el tracto; sangre en el eyaculado; infertilidad del macho; infección. semental Leptospiras

Ambiente

No causa infertilidad a menos que el número de bacterias sea excesivo

Eschericia coli

Ambiente, habita normalmente en el intestino de los animales. Resistente a la gentamicina.

Se ha observado un efecto directo espermicida (posiblemente por la producción de toxinas). Causa aglutinación

Eubacterium suis

Prepucio. Se ha aislado de Causa problemas de infertilidad. Problemas asociados con esta descargas vulvares. son más comunes cuando se usa monta natural Klebsiella spp, Citrobacter spp, Micrococcus spp, son otras bacterias encontradas comúnmente en los eyaculados Fuente de los datos: PIC (2008) 1

127

Revista Computadorizada de Producción Porcina Contaminación del semen porcino/Contamination of boar semen

Volumen 20 (número 3) 2013

1

Tabla 3. Bacterias no encontradas frecuentemente en el semen porcino Entidad Sitio Consecuencias Streptococcus spp Tracto reproductor, localizado Problemas de fertilidad asociados a su efecto en la en testículos; se ha aislado de producción de espermas y a la infección del tracto próstata reproductor femenino Proteus vulgaris

Ambiente

No causa infertilidad a menos que el número de bacterias sea excesivo

Brucellosis

Infección del semental; localizado en los testículos

Orquitis; semen contaminado; infertilidad del semental por degeneración testicular

Erysipelothrix rhusiopathiae

Tracto reproductor

Puede causar inflamación y degeneración testicular

Mycoplasma hyosynoviae

Tracto reproductor

Afecta la calidad seminal

Serratia spp , Serratia marcescens

Contaminación ambiental. Patogénica en animales, causa mastitis en bovinos. En un estudio se encontró contaminando diluyente en polvo. Es resistente a la gentamicina

pH ácido, aglutinación de célula espermáticas, baja motilidad masal, daño acrosomal

Corynebacterium spp

Tracto reproductor; se ha aislado de glándulas vesiculares

Enterobacter spp, Enterobacter cloacae

Contaminación ambiental. En un estudio se encontró contaminando el equipo desechable (reutilizado) de dosificación. Es patógeno oportunista. Resistente a la gentamicina

pH ácido, aglutinación de células espermáticas, baja motilidad masal, daño acrosomal

Acinetobacter spp

Se encuentra en animales y en el ambiente. Resistente a la gentamicina

Aglutinación de eyaculados

Alcaligeners spp

Tracto intestinal de Aglutinación de eyaculados vertebrados. Es oportunista. Resistente a gentamicina Alcaligenes faecalis – aislado de prepucio 1 Bacillus spp, Bordetella spp, Salmonella spp, Actinobacillus, Pasteurella spp, Aeromonas sp. Burkholderia, Providencia sp, Flavobacterium spp, Aerobacter spp, Xanthomonas, Comamonas spp son otras bacterias que se pueden encontrar, aunque no frecuentemente en los eyaculados Fuente de los datos: PIC (2008)

La tabla 4 muestra los resultados hallados por Acosta et al (2009), en semen puro y diluido donde incluyen flora saprofita y patógenos condicionales.

baja frecuencia de aislamientos realizados, a partir de muestras de semen o por las dificultades prácticas para poner en evidencia estos agentes por cultivo microbiológico.

Estas evidencias permitieron sugerir, que el semen fue el vehículo para la producción de problemas reproductivo de índole infeccioso, que causaron retorno al celo en la granja objeto de estudio.

Un aspecto en el que se ha logrado consenso general, es que los géneros bacterianos más frecuente aislados del eyaculado de los verracos son Eschericia coli, Staphylococcus ,Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus spp y ß hemolítico. Coincidentemente, se han informado procesos piometrales en cerdas inseminadas artificialmente en períodos fuera del estro con semen contaminado con estos agentes (Althouse et al 2000; Toniolli et al 2002; Bielanski et al 2003; Conza et al 2004), lo que puede sugerir la relación de estos géneros bacterianos con procesos de infertilidad en las granjas

Otras bacterias han sido encontrada en el semen eventualmente, ejemplo de ellas son los Mycoplama hyopneumoniae, hyorhinis, verecundun y los Ureaplasmas (Martínez 1987; Althouse 1999). Sin embargo, no existe consenso general respecto a su presencia en el semen, por la

128

Revista Computadorizada de Producción Porcina Contaminación del semen porcino/Contamination of boar semen

evaluadas. En investigaciones más recientes realizadas por Maroto (2006), quedó demostrado que la presencia de Eschericia coli provocó una disminución significativa del tamaño de la camada, cuando las cerdas fueron inseminadas con semen contaminado con esta bacteria. Existe información que indica, que los componentes nutritivos de los diluentes facilitan la sobrevivencia y multiplicación de las bacterias en el semen diluido, incluso con la temperatura de conservación recomendadas en cada caso, esto explica por que se han aislado con frecuencia estos gérmenes.

Tabla 4. Géneros bacterianos presentes en el semen, in natura, puro y diluido In natura Diluído Género n % n % Micrococcus spp 8 42.1 4 28.6 Pseudomonas spp 4 21.1 6 42.8 Pseudomonas fluoresens 0 0 1 7.1 Streptococcus suis II 1 5.2 0 0 Streptococcus spp 2 10.5 1 7.1 Staphylococcus spp 2 10.5 0 0 Escherichia coli 1 5.2 0 0 Citrobacter frurundii 1 5.2 0 0 Proteus spp 0 0 2 14.2 Bacillus spp 0 0 0 0 Total 19 100 14 100 Fuente de los datos: Acosta el al (2004)

Las levaduras provenientes del medio ambiente pueden estar presentes además en el semen (Pineda y Santander 2007). Otros microorganismos que pueden encontrarse en el semen son Adenovirus, Cytomegalovirus, Reovirus, el virus de la influenza porcina, el de la gastroenteritis transmisible, el del papiloma genital transmisible y el de la encefalitis hemoaglutinante. Si tenemos en cuenta, la contaminación seminal, es un hecho que puede estar presente en un gran por ciento o en todos los eyaculados que se destinan a la inseminación artificial y una gran variedad de microorganismos, ya sean patógenos o saprofitos pueden causarla. Se impone un control microbiológico como parte del procedimiento para la contrastación de la calidad de los eyaculados porcinos.

CONTROL DE LA CONTAMINACIÓN Todo el semen que se produce en los laboratorios de IA debe ser sometido a un riguroso control de calidad, que incluye, dentro de otros aspectos el chequeo microbiológico de forma rutinaria (Mitsutoshi 2000). Claro está, que estos análisis son costosos y en ocasiones son innecesarios, por eso se recomienda que los análisis bacteriológicos se realicen siempre que exista un aumento de la aglutinación (65%), cuando se haga visible al microscopio la contaminación, cuando exista disminución del tiempo de conservación o cuando esté aumentado el retorno al celo, y existan descargas vaginales post inseminación. Conjuntamente con la bacteriología seminal, debe prestarse especial atención a la resistencia a los antibióticos, ya que es un fenómeno que a menudo se presenta y que puede ser un indicativo de contaminación bacteriana severa (Famiglietti et al

Volumen 20 (número 3) 2013

2005). En este sentido Mateusen (2004), ha señalado, que la sensibilidad de las bacterias a los antibióticos no es constante, ya que estas son muy adaptables y cambian fácilmente. Por lo que cada laboratorio debe estar claro sobre cual antibióticos emplear. Debido a la importancia de este fenómeno, se han llevado a cabo estudios (tabla 5) en los cuales se describe la sensibilidad de los microorganismos frente a un grupo de antibióticos comúnmente usados para proteger al semen una vez diluido, uno de ellos es el realizado por LABOFARM (1994).

Tabla 5. Espectros de sensibilidad de los principales gérmenes detectados en el semen del verraco Gérmenes Antibióticos sensibles, % Gentamicina 89 Espectinomicina 80 Neomicina 77 Flumequina 73 Acido oxolínico 71 Colistina 70 Ampicilina 55 Amoxicilina 55 Trimetoprim 53 Tetraciclinas 18 Fuente de los datos: LABOFARM (1994)

La Unión Europea, en su Directiva 90/429/CEE del Consejo, que regula las normas de política sanitaria para los intercambios intracomunitarios y a las importaciones de semen de la especie porcina, plantea que se deberá utilizar una combinación de antibióticos eficaces, en particular contra las leptospiras y los micoplasmas. La concentración que se empleará deberá tener las concentraciones siguientes: mínimo: 500 UI de estreptomicina/mL, 500 UI de penicilina/mL, 150 mg de lincomicina/mL, 300 mg de espectinomicina/mL y conservar el semen diluido a una temperatura de 15ºC durante 45 minutos como mínimo. En sentido general todas las medidas que se tomen, protocolos de mínima contaminación, están diseñadas, para reducir los riesgos presentes en cada punto crítico de contaminación de los eyaculados. En particular estos protocolos incluyen un grupo de prácticas cotidianas encaminadas a la reducción de la contaminación del semen fresco o diluido. Control higiénico y sanitario Identificar los puntos críticos de contaminación es el punto de partida para establecer el control higiénico sanitario ya que cada centro tiene características propias (Arlegui 2006; Le Coz 2006; Pineda y Santander 2007; Weitze 2007; Acosta (2009). La vigilancia diaria del estado de salud de los verracos es un aspecto de vital importancia por lo que debe evitarse el uso de sementales que tengan signos aparentes de enfermedades infecciosas. La extracción de los machos problemáticos debe realizarse al final para evitar contaminaciones cruzadas. Es necesario realizar el análisis microbiológico del semen puro y diluido (mensuales o trimestrales y ante las situaciones

129

Revista Computadorizada de Producción Porcina Contaminación del semen porcino/Contamination of boar semen

descritas al inicio de este acápite), extender éste, si es necesario, a los distintos puntos críticos identificados. Si el conteo de ufc/mL es mayo de 10 000), deben tratarse los sementales, es decir,medicar el pienso con antibióticos de amplio espectro). El diluente debe ser protegido con un antibiótico no espermicida de amplio espectro, preferiblemente que sea efectivo a las bacterias encontradas en los análisis microbiológicos. El registro de los resultados de los análisis bacteriológicos debe ser mantenido, a fin de evaluar la eficacia de las medidas de higiene establecidas. El área de extracción, incluyendo al maniquí, debe de ser limpiada después de cada colección, y desinfectada una vez por semana así, como el área donde se alojan los sementales que debe ser limpiada diariamente y desinfectada una vez al mes. Debe mantenerse un estricto control de las moscas, roedores y otros vectores. La desinfección del laboratorio debe realizarse una vez por semana y de todos sus locales una vez al mes. El material reutilizable del laboratorio debe lavarse con un detergente neutro que no deje residuos, después aclararlo con agua destilada y en caso de que el material lo permita, esterilizarlo por calor en la estufa, 120ºC durante dos horas. Las mesetas y suelos del laboratorio deben ser lavadas diariamente con detergentes que no dejen residuos y posteriormente limpiar las mesetas con alcohol isopropílico al 70%. La calidad del agua utilizada en el laboratorio debe monitorearse. El agua ha de ser fresca y por lo menos bidestilada en filtros de cristal o haber pasado por ósmosis inversa, desionizada y expuesta a luz ultravioleta. La manera en que el agua se almacena afecta la calidad, por lo que se recomienda, cuando sea posible, guardarla a temperatura de refrigeración, 4 °C, en recipientes de cristal. Para la desinfección deben utilizarse desinfectantes fenólicos. Desinfectantes como la clorhexidina o amonios cuaternarios son de menor utilidad, pues su espectro de acción se centra más en bacterias gram +. La mayoría de bacterias patógenas que se aíslan en dosis seminales son gram -, en su mayoría enterobacterias. Se recomienda utilizar el CID 20, en concentración de 1:400. Debe emplearse la solución en forma nebulizada en el área cerrada del laboratorio sea, nebulizar los sábados en la tarde al terminar la jornada de trabajo, cerrar hasta el día siguiente, en el que se ventila el local); en el resto de las áreas abiertas se puede utilizar la aspersión.

Volumen 20 (número 3) 2013

una colección y otra para evitar contaminación de otros sementales. El material debe ser de preferencia material nuevo, limpio y desechable para la colección. No se debe introducir el material utilizado para la colección al laboratorio y cuando se emplea maniquí debe ser de fácil lavado y que pueda desinfectarse. De manera general deben emplearse otras medidas de control como el monitoreo constante de la calidad del semen. El lavado prepucial, de ser sistemático, será con solución de yodo al 0.5%. Debe procurarse el alojamiento individual de machos jóvenes, ya que reduce la actividad homosexual entre éstos, práctica que puede lacerar el pene y propiciar contaminación. La entrada de personal al laboratorio debe reducirse, mantener puertas y ventanas cerradas y utilizarse batas sanitarias. El material que no pueda se sometido al calor como mínimo, debe lavarse con detergente para laboratorio, enjuagarse con agua potable, aclararse con agua destilada y posteriormente con alcohol desnaturalizado al 70%. El material de laboratorio debe guardarse en bolsas de plástico o en estantes cerrados, tapados con papel de aluminio que impidan su contaminación. Para la establecimiento y cumplimiento de todas las medidas debe establecerse un programa de capacitación y selección del personal para poder cumplir las normas y disciplinas de trabajo. Envío de muestras Las muestras deben ser enviadas según planificación de cada laboratorio de inseminación artificial en particular, siempre siguiendo las recomendaciones del presente acápite y que fueron descritas en párrafos anteriores. Los procedimientos generales incluyen tomar hisopos de las superficies y materiales que entra en contacto con el semen, para cultivo bacteriológico. Deben enviarse muestras de semen puro y semen diluido (3 mL) en frascos estériles con capacidad para 10 mL con tapa que asegure el sellado, enviar muestras de agua destilada, en frascos estériles de 500 mL. Las muestras deben ser tomadas en condiciones de asepsia, para lo cual se deben usar guantes quirúrgicos y los recipientes para su embalaje deben estar previamente esterilizados; estas deben ser debidamente identificada con el número de semental y la fecha de colección. Durante el traslado al laboratorio las muestras deben mantenerse en termos refrigerados o en recipientes con hielo y las tapas deben sellarse con parafina. (Anónimo 2004).

Medidas para el control higiénico y sanitario CONCLUSIONES Para un buen control higiénico sanitario es necesario mantener una serie de medidas tanto de manejo como generales. Entre las medidas de manejo establecidas se encuentra el corte sistemático del pelo de la zona del prepucio, tomar siempre el pene de manera perpendicular y que el eyaculado vaya del pene directo al termo, que no resbale por los guantes, colocar la gasa estéril de manera tal que impida la entrada de tapioca, vaciar el divertículo prepucial antes de la extracción y limpiar la zona alrededor, No debe de recogerse la fracción preespermática pues contiene gran cantidad de bacterias procedentes del tracto uretral. Igualmente, hay qu desechar las fracciones pre-espermática (gel y líquida) y la fracción postespermática gelatinosa.

En consecuencia con todo lo anterior señalado, debemos asumir que: el semen proveniente de sementales con un correcto estatus sanitario, es segregado sin la presencia de microorganismos, pero puede contaminarse con bacterias saprofitas o patógenas condicionales que se encuentran en el tracto genito urinario o en el ambiente. Esta contaminación de cualquier forma puede disminuir su calidad y afectar los resultados de fertilidad. Evitarla es casi imposible, por lo que la manera más eficaz de controlarla radica en extremar las medidas de higiene, instrumentando protocolos de mínima contaminación que incluyan todas las etapas de obtención, procesamiento y almacenamiento del semen porcino.

En cuanto al a técnica empleada; cuando se use la técnica de la mano enguantada o del "doble guante"; en caso de no hacerlo, asegurar el lavado y uso de un desinfectante entre

130

Revista Computadorizada de Producción Porcina Contaminación del semen porcino/Contamination of boar semen

AGRADECIMIENTOS

anormalidades en el semen de verraco. Avances en Tecnología Porcina, 2:103-113

El autor agradece a la Sra. Consuelo Díaz, por sus sugerencias en la preparación del manuscrito y en la versión en inglés del mismo texto.

REFERENCIAS Acosta, M.J., Perdigón, R. y Ruedas, M. 2009. Evaluación de la contaminación bacteriana de semen porcino puro y diluido. XIII Forum de Ciencia y Técnica. Instituto de Investigaciones Porcinas. La Habana, pp 16 Althouse, G.C. 1999. Orígenes y efectos de la contaminación microbiológica en el semen porcino conservado. ANAPORC, 192:83-94 Althouse, G.C. y Lu, K.G. 2005. Bacteriospermia in extended porcine semen. Theriogenology, 63:573-584 Althouse, G.C., Kuster, C.E., Clark S.G. y Weisiger, R.M. 2000. Field investigation of bacterial contaminants and their effects extended porcine semen. Theriogenology, 53:1167-1176 Anónimo. 2004. Envío de as mostras de semen para examenes especiais. Suinos & Cia, 08:27-29 Arlegui, R. 2006. Principales puntos críticos en un centro de inseminación. Magapor, S.L. Versión electrónica disponible en el sitio: http://www.engormix.com/s_articles_view.asp?art=1031&ARE A=POR-103 Aurich, C. 2005. Factors affecting the plasma membrane function of cooled-stored stallion spermatozoa. Animal Reproduction Science, 89:65-75 Barrera, X. y Buxadé, C. 2007. Exigencias actuales de calidad del semen de verraco. Mundo Ganadero. Madrid, pp 196 Bielanski, A., Bergeron, H., Lau, P.C. y Devenish, J. 2003. Microbial contamination of embryos and semen during long term banking in liquid nitrogen. Cryobiology, 46:146-152 Conza, L., Calle, B., Echevarría, S. E., Néstor, L., Falcón, C. y Cerón, M. 2004. Evaluación bacteriológica de semen de verracos usados como reproductores en granjas porcinas de la zona de Lurín, Lima. Investigaciones Veterinaria,15:163-165 De Cuadro, G. 2000. Control sanitario de los verracos en un centro de producción de semen. In: 5o Seminário Internacional de Suinocultura. L’Aigle (Francia), version electrónica disponible en disco compacto Del Toro, Y., Arias, T., Morales, G. y Diéguez, F.J. 2001. Desarrollo de la inseminación artificial en Cuba. ANAPORC, 210:62-74 Famiglietti, A., Quinteros, M. y Vázquez, M. 2005. Consenso sobre las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos en Enterobacteriaceae. Revista Argentina de Microbiología, 37:57-66 Flowers, W.L. 2005. motilidad/morfología y

Volumen 20 (número 3) 2013

Descripción causas de

detallada de la aparición

la de

Higuera, M.A. 2003. Técnica Kubus para mejorar la I.A. porcina. In: III Congreso Nacional de Porcinocultura & Expo Porcina. Madrid, versión electrónica disponible en el sitio: http://www.ecampo.com/media/news/nl/ganporcinosreprod10.. htm Hume, E. y Willcox, M. 2004. Aparición de Serratia marcescens como un patógeno de superficie ocular. Archivos de la Sociedad Española de Oftalmología, 79:475-481 Johnson, L.A., Weitze, K.F., Fiser, P. y Maxwell, W.M.C. 2000. Storage of boar semen. Animal Reproduction Science, 62:143172 Kuster, C. y Althouse, G.C. 1997. Sperm agglutination of extended semen caused by gentamicin-resistant bacteria. American Association of Swine Practitioners. p 293-295 LABOFARM, 1994. Espectros de sensibilidad de los principales gérmenes detectados en el semen de verraco. Versión electrónica disponible en el sitio: http://www.ceniap.gov.ve/pdf/monografías/cd%20porcinos/porc inos/contenido/vmane.ecampo.com/media/nl/ganporcinoreprod 10.htm Le Coz, P. 2006. Las enfermedades y el semen. Versión electrónica disponible en el sitio: http://3tres3.com/inseminacion_artificial/index.php?id_ficha=30 &id_rel=22. Maroto, L.O. 2006. Escherichia coli as contaminant of boar semen: role of F1 fimbrial lectins in the sperm agglutination phenomena. Tesis DrSci. Institute of Molecular Biology and Biotechnology. Bruselas. pp 150 Martín Rillo, S., De Alba, C., Corchera, B. y Strzezek, J. 1999. Efecto de la calidad seminal sobre la supervivencia embrionaria. ANAPORC, 185:42-52 Martínez, E., García, P. y Peraza, N. 1983. Determinación del nivel de contaminación bacteriana de varillas para la inseminación artificial esterilizadas mediante alcohol y radiaciones ultravioletas. Revista Cubana de Reproducción Animal, 8:103-110 Martínez, E., García, P., Del Toro, Y., Morales, G., Tosar, M. y Hernández, F. 1992. Parámetros bacteriológicos en semen porcino de la línea CC21. Revista Cubana de Reproducción Animal, Edición especial:132-140 Martínez, E., Peraza, N. y García, P. 1984. Evaluación bacteriológica de semen bovino. I. Sementales de la raza Holstein. Revista Cubana de Reproducción Animal, 10:7-15 Martínez, E., Peraza, N. y García, P.1987. Análisis bacteriológico del semen y fomites. Revista Cubana de Reproducción Animal, 13:81-102 Mateusen, B., Deuchande, R., Maes, D., Van Soom, A., Deley, W.y Kruif, A. 2004. Effect of extender and bacterial contamination on boar sperm motility parameters assessed by computer assisted sperm analysis (casa). In: 18th International Pig Veterinary Society (IPVS) Congress. Hamburg, 2:458

131

Revista Computadorizada de Producción Porcina Contaminación del semen porcino/Contamination of boar semen

Volumen 20 (número 3) 2013

Mirjyn, A. 1999. Stimulation and detection of heat in gilts and sows, North Carolina State University Report 12. Raleigh, pp

influencia sobre la calidad bacteriológica del eyaculado. Revista de Producción Animal, 13:81-84

Mitsutoshi, Y. 2000. Conservation of sperms: current status and new trends. Animal Reproduction Science, 60/61:349-355

Weitze, K.F. 2007. Higiene: la clave para obtener una buena calidad de semen. Avances en Tecnología Porcina, 4:40-44

Monga, M. y Roberts, J.A. 1994. Sperm agglutination by bacteria: receptor-specific interactions. Journal of Andrology, 15:151-156 OIE. 2007. Código Sanitario para los Animales Terrestres Parte 3. Título 3.2. Capítulo 3.2.2. Anexo. 3.2.2. Semen de Verracos. Versión electrónica disponible en el sitio: http://www.oie.int/esp/normes/mcode/es_chapitre_3.2.2.htm PIC. 2008. La contaminación del semen porcino. Primera parte. Versión electrónica disponible en el sitio: http://www.engormix.com/la_contaminacion_semen_porcino_s _articulos_121_por.htm Pineda, Y. y Santander, J. 2007. Evaluación de la flora bacteriana del semen de verracos en granjas porcinas de Venezuela. Revista de Zootecnia Tropical, 25:173-177 Sala, R., Reguera, G., García, P. y Pérez, B. 2008.Influencia del calentamiento de las dosis seminales porcinas sobre la calidad espermática durante la I.A. Avances en Tecnología Porcina, 5:34-42 Serra, L. 2005. Control sanitario Toros y Semen. Ltda - Uma empresa do grupo CRV. Versión electrónica disponible en el sitio: http://www.lagoa.com.br/espanhol/main_texto.asp?idTexto=41. Serrano, M. 1995. Control bacteriológico del semen de verraco y su relación con la reproducción en la hembra. Ciencias Veterinarias, 24:767-775 Serrano, M., Milan, J.L., Miguel, J.A. y García, P. 1994. Análisis bacteriológico de dosis seminales del verraco. In: 7as Jornadas Internacionales de Reproducción Animal, Murcia, pp 405 Simmet, C. 2000. Bioseguridad en Centros de Inseminación. Fuente: Agrupación de Consultores en Tecnologías del Cerdo. Versión electrónica disponible en el sitio: http://www.ecampo.com/media/nl/ganporcinoreprod10.htm Sone, M. 1990. Investigation on the control of bacteria in boar sperm. Journal of Animal Reproduction, 36:23-29 Tamuli, M., Sharma, D. y Rajkonwar, C. 1984. Studies of the microbial flora of boar semen. Indian Veterinary Journal, 61:858-861 Tapia, B. y Córdova, A. 2007. Estrés oxidativo y capacidad fecundante de los espermatozoides. Avances en Tecnología Porcina, 4:35-43 Thibier M. y Guerin, B. 2000. Hygienic aspects of storage and use of semen for artificial insemination. Animal Reproduction Sciencie, 62:233-251 Toniolli, R., Ferreira, R., Fiúza, P., Queiroz, D. y Sampaio, B. 2002.Diferentes tipos de higienización del verraco y su

132