Lípidos y Lipoproteínas Química Clínica JTP Clelia Innocente

LIPOPROTEINAS Lipoproteína

Densidad (g/l)

Componente principal

Migración EF (agarosa)

Lipídico

Proteico

Quilomicrón

< 0,95

Origen

TG exógenos

Apo B 48, A I, A IV, C, E

VLDL

0,95 – 1,006

Prebeta

TG endógenos

Apo B 100, C, E

IDL

1,006 – 1,019

Beta

CE / TG

Apo B 100, E

LDL

1,019 – 1,063

Beta

CE

Apo B 100

HDL

1,063 – 1,210

Alfa

FL / COL

Apo AI, AII, C, E

Lp(a)

1,055 – 1,085

Prebeta 1

CE

Apo B 100, Apo (a)

LIPOPROTEINAS

LIPOPROTEINA (a)

Composición química (semejante a LDL)  lípidos: CE (1/3 aprox.)  proteínas: Apo(a), Apo B100 (1/3 aprox.)  hidratos de carbono: ácido siálico (28% de su peso) Densidad: 1,055 (semejante a HDL)  Por Ultracentrifugación se separa con HDL Movilidad electroforética: pre-beta 1 (semejante a VLDL)  Por Electroforesis se separa con VLDL

LIPOPROTEINA (a) Acción  PRO-ATEROGENICA  Concentración y tamaño  Modificación: Oxidación  Macrófagos – células espumosas  PRO-TROMBOTICA  Inhibición de fibrinolisis por competencia c/ t-PA; u-PA  Agregación plaquetaria (Integrina)  Alteración Endotelial (Tetranectina)

LIPOPROTEINA (a) METODOLOGIA ENSAYOS CUALITATIVOS  ELECTROFORESIS (Soporte: gel de agarosa)

Banda pre-beta1 Muestra: suero fresco 88% sensibilidad 77% especificidad (kit comercial: HYDRAGEL LIPO+Lp(a) – SEBIA) ENSAYOS CUANTITATIVOS  ELISA  EID por Rocket  Turbidimetría/Nefelometría  RIA

Calibración del método: cubrir todas las isoformas, sobre todo de tamaño, aunque sea las de la población en estudio

APOPROTEINAS HUMANAS (en ayunas) Distribución en LP (mol) Plasma (mg/dl)

HDL

LDL

IDL

VLDL

Fuente

Apo A I

130

100

Hígado (70%) Intestino (30%)

Apo A II

40

100

Hígado

Apo B

80

Apo C I

6

Apo C II Apo C III Apo E

90

8

2 Hígado

97

1

2 Hígado

3

60

10

30 Hígado

12

60

10

10

20 Hígado

5

50

(10)

20

20 Hígado

APOPROTEINAS HUMANAS

APOPROTEINA E E2 E3 E4

112 cisteína cisteína arginina

158 cisteína < capacidad de unión arginina unión normal (>frec) arginina

 Paciente homocigota E2/E2

alta probabilidad de desarrollar Disbetalipoproteinemia (tipo III)+Factor disparador  Pacientes con E4 se asocian con hipercolesterolemia.

FUNCIONES DE LAS APOPROTEINAS  ESTRUCTURAL  LIGANDO UNION A Rc  ACTIVACION DE ENZIMAS  INHIBICION DE ENZIMAS  TRANSFERENCIA DE CE  TRANSFERENCIA DE PL

Apo B48, B100, AII,AI Apo E, B100 , AI Apo AI, CII Apo CIII (CETP) (PLTP)

Significación clínica: Apo AI y Apo B  para evaluar riesgo coronario

 para diagnóstico de DLP primarias

APOPROTEINAS METODOLOGIA Todos los ensayos son inmunológicos (Ag-Ac)  En soporte agarosa:  IDR: INMUNODIFUSION RADIAL

 EID: ELECTROINMUNODIFUSION (ROCKET)

Valor de Referencia: Apo A I > 125; Apo B 50-125 (mg/dl)  En suspensión acuosa:  NEFELOMETRIA: dispersión de luz incidente a 60° y 90°

(Nefelómetro automático cinético)  TURBIDIMETRIA: mide turbidez con luz incidente a 180° Valor de Referencia: Apo A I > 122; Apo B 73-141 (mg/dl)

ENZIMAS FUNCION

ORIGEN

COFACTORES ACTIVADORES

SUSTRATOS

LPL

Trigliceridohidrolasa Fosfolipasa

Tejido adiposo Tejido muscular (esq. y card.)

Apo C II Insulina

Qm VLDL (IDL)

Tejido hepático

LH

Triglicéridohidrolasa Fosfolipasa

Insulina Hnas. Tiroideas Andrógenos

IDL HDL2

Colesterolesterasa

Tejido hepático (circula unida a ApoAI-HDL)

Apo A I Apo E

CL de HDL

Paraoxonasa Arilesterasa Lactonasa

Tejido hepático (circula unida a ApoAI-HDL)

LCAT

PON 1 (2,3)

Paraoxón Peróxidos lipídicos (LDL – HDL) sustr fisiológico ?

RECEPTORES RECEPTOR

LOCALIZACION

LIGANDO

LIPOPROTEINA

B:E – LDLR

Hepática Extrahepática

Apo B 100 Apo E

LDL IDL HDLc = ? (HDL1)

E (LRP)

Hepática

Apo E

Qmr IDL HDLc

Scavenger

Macrófagos

? (No regulable)

LDL, LDL modif IDL, beta-VLDL Lp(a)

SR-B1/SR-BI

Hepática y Extrahepática

Apo AI

HDL

ABC A1 ABC G1

Extrahepática y Hepática Macrófagos

Apo AI

Colesterol libre y Fosfolípidos

VIA METABOLICA EXOGENA: lípidos dietarios

SINTESIS HEPATICA DE VLDL

VIA METABOLICA ENDOGENA: lípidos de síntesis

TRANSPORTE REVERSO DEL COLESTEROL

DISLIPOPROTEINEMIAS Clasificación etiológica  PRIMARIAS: de causa genética

monogénicas poligénicas

 SECUNDARIAS: asociadas a una patología de base

Clasificación lípidometabólica  HIPOLIPIDEMICAS  NORMOLIPIDEMICAS  HIPERLIPIDEMICAS

HIPOLIPOPROTEINEMIAS PRIMARIAS  Alteración fracción beta – defectos en Apo B  Abetalipoproteinemia  Hipobetalipoproteinemia (gen Apo B)

 Alteración fracción alfa – defectos en Apo A I  Analfalipoproteinemia  Enfermedad de Tangier (gen ABCA1 – PON1 dism)

 Hipoalfalipoproteinemia  Deficiencia familiar de LCAT  Enfermedad de ojo de pescado (PON1 dism)  Mutación Apo A I

HIPERLIPOPROTEINEMIAS  Clasificación fenotípica (Fredrickson y col) Fenotipo

Colesterol

Triglicéridos

Alteración LP

Aspecto del suero

Aumento Qm

Lechoso con capa cremosa

Aumento LDL

Límpido

A

Aumento LDL + VLDL

Opalescente a turbio

AA

AA

Aumento IDL (beta-VLDL)

Turbio

IV

N oA

AA

Aumento VLDL

Opalescente a turbio

V

A

AAA

Aumento Qm +VLDL

Turbio - Lechoso

I

N oA

AAAA

IIa

AA

N

IIb

AA

III

HIPERLIPOPROTEINEMIAS  Clasificación fenotípica (Fredrickson y col) – aspecto del suero

HIPERLIPOPROTEINEMIAS Signos y síntomas:  ATEROSCLEROSIS  Coronaria: IAM – SCA – CI  Cerebral: ACV  Periférica

 MANIFESTACIONES CUTANEAS  Xantomas

 CONSECUENCIAS MENOS FRECUENTES  Pancreatitis aguda

HIPERLIPOPROTEINEMIAS

HIPERLIPOPROTEINEMIAS Clasificación clínica:  HIPERCOLESTEROLEMIA  HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR  HIPERCOLESTEROLEMIA POLIGENICA

 HIPERTRIGLICERIDEMIA

SINDROME QUILOMICRONEMICO  DEFICIENCIA FAMILIAR DE LPL

 DEFICIENCIA FAMILIAR DE APO CII  HIPERTRIGLICERIDEMIA FAMILIAR  HIPERTRIGLICERIDEMIA ESPORADICA

 HIPERLIPIDEMIA MIXTA  HIPERLIPEMIA FAMILIAR COMBINADA

HIPERAPOBETALIPOPROTEINEMIA  DISBETALIPOPROTEINEMIA FAMILIAR

HIPERCOLESTEROLEMIA Definición: C-LDL > 160 mg/dl  HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR  Defecto bioquímico: Deficiencia o alteración del receptor de LDL (B:E) Defecto familiar de Apo B100.  Clínica: Xantomas tendinosos y tuberosos, xantelasmas, arco corneal, aterosclerosis prematura.  Fenotipo de expresión: IIa (IIb)  Frecuencia: Homocigotas 1/100000 Heterocigotas 1/500  Laboratorio: Colesterol total Homocigotas: 600 – 1000 mg/dl Heterocigotas: 300 – 450 mg/dl

HIPERCOLESTEROLEMIA  HIPERCOLESTEROLEMIA POLIGENICA  Defecto bioquímico: Aumento de síntesis de LDL – Apo B?, mayor

frecuencia de alelo E4?.  Clínica: Xantelasmas, arco corneal, aterosclerosis prematura,  Fenotipo de expresión: IIa (IIb)  Laboratorio: Colesterol total = 250 – 350 mg/dl  Presentación: > 20 años  Se asocia frecuentemente con Diabetes, Obesidad, Hiperuricemia

HIPERTRIGLICERIDEMIA  DEFICIENCIA FAMILIAR DE LPL o APO CII  Defecto bioquímico: Ausencia de actividad o estructura anormal de LPL

y/o Apo CII  Clínica: Xantomas eruptivos, lipemia retinalis, hepatoesplenomegalia, pancreatitis aguda.  Fenotipo de expresión: I y V  Laboratorio: Qm en ayunas Triglicéridos = 500 - >1000 mg/dl

HIPERTRIGLICERIDEMIA  HIPERTRIGLICERIDEMIA FAMILIAR  Defecto bioquímico: Disminución del catabolismo de las LP ricas en

triglicéridos.  Clínica: Xantomas eruptivos, hepatoesplenomegalia.  Fenotipo de expresión: IV  Laboratorio: Triglicéridos = 200 – 500 mg/dl  Prevalencia: 1%  Frecuente asociación con Diabetes, Hipertensión arterial, Hiperuricemia.

HIPERLIPEMIA MIXTA  HIPERLIPEMIA FAMILIAR COMBINADA  Defecto bioquímico: Sobreproducción de Apo B, aumento de VLDL,

aumento de LDL.  Clínica: Aterosclerosis prematura, (Xantomas).  Fenotipo de expresión: IIb, IV, IIa  Prevalencia: 0,5 – 1%  Frecuente asociación con Obesidad, Hipertensión arterial, Hiperuricemia, Insulinoresistencia.

HIPERLIPEMIA MIXTA  HIPERAPOBETALIPOPROTEINEMIA  Defecto bioquímico: Sobreproducción hepática de Apo B con aumento de

secreción de VLDL.  Clínica: Aterosclerosis prematura, (Xantomas).  Fenotipo de expresión: IIb, IV  Laboratorio: LDL-C normal en pl, Apo B aumentada en pl. COL/ApoB en LDL < 1,3 LDL pequeñas y densas

HIPERLIPEMIA MIXTA DISBETALIPOPROTEINEMIA FAMILIAR  Defecto bioquímico: Bloqueo en catabolismo de remanentes (genotipo E2/E2 + factor disparador). Aumento de IDL.  Clínica: Aterosclerosis prematura, (Xantomas).  Fenotipo de expresión: III  Laboratorio: Relación Col:Tg = 1:1 (300 – 450 mg/dl) beta-VLDL (IDL, Qmr, VLDLr) banda ancha entre beta y prebeta en el LPG  Condiciones desencadenantes:  Hipotiroidismo  Intolerancia a la glucosa  Obesidad  Hipercolesterolemia

ALTERACIONES CUALITATIVAS DE LAS LP LDL MODIFICADAS  LDL CON MUTACION PUNTUAL DE APO B100  LDL OXIDADA  LDL GLICOSADA  LDL CARBAMILADA  LDL RICA EN TG  LDL POLIDISPERSA

PATRON A: predominio de LDL grande y liviana PATRON B: predominio de LDL pequeña y densa

ALTERACIONES CUALITATIVAS DE LAS LP

ALTERACIONES CUALITATIVAS DE LP Modificaciones frecuentes de LDL en Hipertrigliceridemia o LDL rica en TG tipo de precursor causas intercambio COLxTG con VLDL (CETP) actividad LH o LDL pequeña y densa IDL LH LDL grandes y livianas LDL típicas LDL pequeñas y densas Modificaciones de LDL en Hiperglucemias o LDL-Apo B + glucosa LDL glicosilada (producto de Amadori) AGE

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS

VLDL

INSULINA (+) LPL tejido adiposo IDL LPL tejido muscular B:E E

Andrógenos Hnas. Tiroideas (+) (+) LH

Estrógenos (-) LDL

B:E (+) INSULINA T3 Estrógenos

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS DIABETES MELLITUS DM tipo 1 INSULINA

Ausente o Disminuida

Actividad LPL y LH

Disminuida

Catabolismo de Qm, VLDL e IDL Qm + Qmr Qm + VLDL IDL HDL

Presentes Aumentadas Aumentadas Normal o Disminuidas

Disminuido

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS DIABETES MELLITUS DM tipo 2 INSULINA

Aumentada

Síntesis y secreción de VLDL Actividad de LPL y LH VLDL Aumentadas VLDL + LDL Aumentadas IDL Aumentadas Qmr Presentes HDL Normal o Disminuidas

Aumentada Normal o Disminuida

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS DIABETES MELLITUS TIPO 2  Aumento de triglicéridos plasmáticos  Baja concentración de HDL-C  Predominio de LDL pequeñas y densas  Lipemia posprandial excesiva

VLDL-C/TG = 0,2 (1/5) > 0,30 VLDL rica en COL (1/6) < 0,17 VLDL rica en TG (1/4)

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS DIABETES MELLITUS TIPO 2

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS DM 2 – OBESIDAD – SM INSULINORESISTENCIA En tejido adiposo INSULINA LHS compensadora

FFA

Hígado VLDL grande, rica en TG IDL LDL pequeña y densa

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS DM 2 – OBESIDAD – SM INSULINORESISTENCIA En hígado Hiper INS síntesis TG VLDL FFA

LH

síntesis Apo B

mayor nº VLDL típicas TG CETP COL HDL rica en TG

VLDL1 grande, rica en TG VLDL rica en COL Macrófagos

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS DIABETES MELLITUS TIPO 2

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS OBESIDAD

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS OBESIDAD

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS SINDROME METABOLICO

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS SINDROME METABOLICO

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS ENFERMEDADES HEPATICAS COLESTASIS Obstrucción intra o extra hepática Aum COL a expensas de COL libre (aum HMGAR biosíntesis) LCAT Dism (o N dependiendo del daño hepático), CETP Dism Aum COL y PL por regurgitación biliar (R COLlibre/PL = 1) LpX: 400 – 600 A, discoidal, forma pilas de monedas, fracción proteica: Albúmina y Apo C, movilidad catódica. En el 40% de los casos LH Dism, LDL ricas en TG, HTG HDL Dism: anómalas, movilidad beta, discoidales, forma pilas de monedas, dism en Apo AI y enriquecidas en Apo E Xantomas tendinosos, xantelasmas, target cells

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS ENFERMEDADES HEPATICAS HEPATITIS Viral o alcohólica ante una ingesta abundante TG Aum, HTG LH Dism, LDL ricas en TG Actividad LCAT Dism por disminución de síntesis y por disminución de su cofactor Apo AI R CE/CL Dism HDL dism, ricas en Apo E y en PL, movilidad beta VLDL anómalas, ricas en Apo B y pobres en Apo E y Apo C, movilidad alterada LG: banda única con movilidad entre beta y prebeta, ausencia de alfa

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS SINDROME NEFROTICO Proteinuria (Alb), Hipoalbuminemia, Edema, HTA, Dislipemia Dism P oncótica, aum selectivo de síntesis hepática, aum Apo B, aum VLDL, aum CETP (VLDL y IDL ricas en col), en etapas terminales dism el catabolismo, dism LPL, Apo CIII/ApoCII aum, AGL aum libre sin alb, > feed back Apo E dism (síntesis renal) LCAT dism (CE dism), lisolecitina aum libre sin alb, > feed back Aum Apo A, pierden HDL por orina, HDL en plasma normal (compensada), HDL3 retenida en cilindros grasos, cristales de col en las células epiteliales: cuerpos ovales R C-LDL/C-HDL alta, R Pts/Col en cada LP alta Col total aum en relación a la dism de Alb Lp(a) muy aum en primeras etapas y estadíos terminales

Fenotipo IIa (por HCOL) Fenotipo IIb en estados avanzados (por HCOL + HTG)

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS INSUFICIENCIA RENAL CRONICA Aum TG (400 – 500 mg/dl) con TFC dism (aum de TG en todas las LP) C total y C-LDL normal Masa de VLDL e IDL aum, IDL con Apo C, LH dism, inhibidores del plasma urémico Acumulación de remanentes de LP ricas en TG (VLDL y Qm) Dism LPL, Apo CIII aum, ApoCIII/ApoCII aum, inhibidores del plasma urémico, resistencia periférica por alteración de captación de glu en pl urémico, hiperins compensadora, INS dism en HPT 2º por PTH aum, Ca2+ intracel aum (en cel beta), la INS se degrada en riñón HDL dism, LCAT dism, Apo AI y Apo AII dism Apo B normal o ligeramente dism Apo E dism (síntesis renal) Lp(a) aum

Fenotipo IV (por HTG) Fenotipo III (por beta-VLDL)

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS HIPOTIROIDISMO Dism Rc B:E, aum IDL y LDL, aum de Col Dim LH, aum IDL Dism LPL tejido adiposo (Hipotiroideos obesos), aum VLDL Beta-VLDL por acumulación de remanentes, rica en Apo E HDL normal o aum a expensas de HDL2 por dism LH y dism CETP, Apo AI aum por dism de LH pero dism por dism de síntesis (Hipotiroidismo manifiesto/subclínico) R Ctotal/C-CHDL aum

Fenotipo IIa (por aum LDL) Fenotipo III (por aum IDL, beta-VLDL) Fenotipo IIb (por aum LDL y VLDL) Fenotipo IV (por aum VLDL)

Factor desencadenante de Disbetalipoproteinemia

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS ALTERACIONES HORMONALES EN LA MUJER MENOPAUSIA Efectos de los estrógenos en el retardo del proceso aterosclerótico Directos sobre la pared arterial:  Actúan como antioxidantes  Inducen la vasodilatación mediada por el NO (estimulan la síntesis de sintetasa) y mediada por prostaglandinas (estimulan síntesis)  Inducen la relajación del miocito arterial

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS ALTERACIONES HORMONALES EN LA MUJER MENOPAUSIA Efectos de los estrógenos en el retardo del proceso aterosclerótico Indirectos sobre el metabolismo lipídico: Aum síntesis Rc B:E Al disminuir los estrógenos: Aum COL total  Dism Rc B:E, aum IDL y LDL  IDL ricas en TG, IDL con Apo C, LDL oxidadas, LDL ricas en TG, LDL peq y densas,  

  

LDL glicosiladas Obesidad androide: aum TG, resistencia INS Aum Apo E por aum IDL TG van aum, dentro de valores deseables (edad, hábitos) HDL-C se mantiene ? LH desinhibida, aum LDL, HDL2 a HDL3

DISLIPOPROTEINEMIAS SECUNDARIAS TRATAMIENTO DE REEMPLAZO HORMONAL POSMENOPAUSIA - ANTICONCEPTIVOS El perfil lipídico dependerá de: - vías de administración - dosis - combinación (E+P) Por vía transcutánea (parches) no tienen efectos tan rápidos ni tan fuertes La mejor dosis del Pg a usar será la mínima como para proteger el endometrio y no alterar el perfil lipídico Los andrógenos revierten los efectos de los estrógenos: dism Apo AI, dism HDL, aum LH, dism TG Anticonceptivos con predominio de Egs: dism LDL, aum HDL, aum TG Anticonceptivos con predominio de Pg: dism HDL, no varían los niveles de LDL ni de TG

ATEROGENESIS Fase preproliferativa: infiltración grasa de la pared vascular, asintomática, se inicia en la infancia. Fase proliferativa: aparecen estrías grasas en la aorta, proliferan la capa íntima y la media, asintomática, en la adolescencia, potencialmente reversible si se controlan los factores de riesgo. Fase ateromatosa: hiperplasia de la íntima y media, se forman ateromas con la presencia de macrófagos que fagocitan LDL ox y se calcifican pudiendo evolucionar hacia necrosis vascular. Se manifiesta clínicamente en corazón, cerebro, riñón y extremidades.

ATEROGENESIS

ATEROGENESIS

Fig. 1. Arterias coronarias humanas con diferentes tipos de lesión aterosclerótica. A: placa aterosclerótica compleja vulnerable, con centro necrótico (nc) de gran tamaño y una delgada capa fibrosa (cf). B: placa erosionada con trombo (tr) superpuesto. Tinción de hematoxilina-eosina.

FACTORES DE RIESGO ATEROGENICO Hábitos y características personales que tienen una relación directa con la probabilidad de desarrollar enfermedad cardiovascular (EC – ACV – EVP)  HIPERCOLESTEROLEMIA  SEXO MASCULINO Y FEMENINO POSMENOPAUSIA  HIPERTENSION ARTERIAL  DIABETES (INTOLERANCIA A LA GLUCOSA)  TABAQUISMO

 OBESIDAD  VIDA SEDENTARIA – FALTA DE ACTIVIDAD FISICA  HDL BAJA  ANTECEDENTES FAMILIARES DE EC PREMATURA EN PADRES O HERMANOS  PRESENCIA DE OTRA ECV ATEROSCLEROTICA CONOCIDA  EDAD

Cada uno se relaciona en forma independiente con la aterosclerosis, la combinación de dos o más factores produce un efecto multiplicador sobre la susceptibilidad a la EC

FACTORES LIPIDICOS DE RIESGO INCREMENTO DE COLESTEROL DE LDL, VLDL, IDL. DISMINUCION DE HDL.

HIPERTRIGLICERIDEMIA INCREMENTO DE COLESTEROL No-HDL. INCREMENTO DE LP(a) INCREMENTO DE LDL pequeñas y densas

RIESGO ATEROGENICO FACTORES EMERGENTES         

SINDROME METABOLICO LP(a) FIBRINOGENO, FACTOR VIII, FACTOR VII PCR (Ultrasensible) HOMOCISTEINA INFECCION POR CHLAMYDIA HEMATOCRITO, LEUCOCITOS INCREMENTO DEL PAI-I RESISTENCIA A LA INACTIVACION DE LA PROTEINA C DE LOS FACTORES V Y VIII  GENOTIPO DD PARA LA ENZIMA CONVERTIDORA DE ANGIOTENSINA (ECA)  DEFICIENCIA DE VITAMINAS ANTIOXIDANTES

LABORATORIO CONDICIONES PREANALITICAS PARA EL ESTUDIO DE LIPIDOS  ESTADO METABOLICO ESTABLE  MANTENER DIETA HABITUAL Y PESO ESTABLE POR LO MENOS DURANTE      



2 SEMANAS NO REALIZAR ACTIVIDAD FISICA INTENSA 24 HS. ANTES Y TAMPOCO INGERIR BEBIDAS ALCOHOLICAS EN EXCESO AYUNO DE 12 HS. TOMA DE MUESTRA: SENTADO, REPOSO 5 MINUTOS ANTES, SIN ESTASIS VENOSO MUESTRA: SUERO (PLASMA C/ EDTA – F=1,03 P/ COL) CONSERVACION PARA COL Y TG: HASTA 4 DIAS EN HELADERA EN ESTADO LIQUIDO Y PARA LIPOPROTEINAS: HASTA 48 HS. BIOSEGURIDAD: TRATAR LAS MUESTRAS COMO POTENCIALMENTE INFECCIOSAS REALIZAR 2 DETERMINACIONES CON NO MAS DE 2 SEMANAS DE DIFERENCIA

LABORATORIO  Variabilidad analítica:

C.V.A COLT < 3 % C.V.A TG 42 mg/dL (1,09 mmol/L)

≤ 13

CV ≤ 4%

≤ +5

LABORATORIO  Métodos de separación y cuantificación de HDL-colesterol

Métodos ULTRACENTRIFUGACION ELECTROFORESIS

Fundamento Diferente flotación a densidades concretas por medio de campos gravitatorios intensos Diferente migración de las lipoproteínas en un campo eléctrico

Precipitación selectiva de las lipoproteínas PRECIPITACION QUIMICA no-HDL SEPARACION QUIMICA HOMOGENEOS

Separación magnética de las lipoproteínas no-HDL Inhibición de la concentración del colesterol contenido en las lipoproteínas no-HDL

LABORATORIO  Métodos de separación y cuantificación de HDL-colesterol

LABORATORIO PROGRAMA NACIONAL DE EDUCACION SOBRE COLESTEROL (NCEP) PANEL DE EXPERTOS EN DETECCION, EVALUACION Y TRATAMIENTO DEL NIVEL ALTO DE COLESTEROL EN ADULTOS (ATP I, II, III) Categorías de riesgo y objetivos de terapia

Categoría de riesgo  ECC u otro proceso aterosclerótico  Múltiples factores de riesgo (2 ó +)  Número de factores de riesgo entre 0 – 1

LDL deseable (mg/dl) 240

alto

 HDL-Colesterol < 40

bajo

> 60

alto Circulation 2002;106:3143-3421

BIBLIOGRAFIA  Henry,R; Cannon,D; Winkilman,J “Química Clínica: Bases y técnicas”. Capítulo 12 Lípidos y

dislipoproteinemias. Ed. Aniversario. Editorial Jims.  Albert Oberman y col. “Fundamentos y manejo de los trastornos lipídicos”. Editorial Médica

Hispanoamericana. 1993.  Rafael Carmena. “Riesgo elevado de disfunción lipoproteica en la diabetes mellitus tipo 2”. Rev Esp

Cardiol Supl. 2008:8:19C-26C.  Enrique González Sarmiento y col. “Sindrome metabólico y diabetes mellitus”. Rev Esp Cardiol

Supl. 2005;5:30D-7D.  Módulo Lípidos. Carrera Especialización en Bioquímica Clínica. UBA. 1999.  Curso Bioquímica de Lípidos – Universidad de La Habana – PROECO Campus Virtual, 2012.