Carrera de Especialización en Bacteriología Clínica

12 jun. 2015 - Neuquén, Río Negro, Santa Cruz, ... Caldo. APA. TCBS / TSA. Bqcas. mínimas. Oxidasa/Kligler/LIA. /Indol ... Caldo Bolton (24 h a 42 - 43 ºC).
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Carrera de Especialización en Bacteriología Clínica Módulo Infecciones gastrointestinales Enfermedades transmitidas por alimentos

Resistencia, Chaco, 12 de junio de 2015 Bqa. Elizabeth Miliwebsky Bqa. María Rosa Viñas INEI – ANLIS “Dr. Carlos G. Malbrán” Secretaría de Políticas, Regulación e Institutos Ministerio de Salud [email protected] [email protected]

ENFERMEDADES TRANSMITIDAS POR LOS ALIMENTOS Infección gastrointestinal

Intoxicación

•Síntomas iniciales del tracto gastrointestinal inferior: Diarrea y dolor abdominal

•Síntomas iniciales del tracto gastrointestinal superior: Náuseas y vómitos

•Síntomas secundarios no predominantes: Nauseas y vómitos

•Síntomas secundarios no predominantes: Diarrea y dolor abdominal

•Los microorganismos acceden al hospedador y desarrollan dentro de él su acción patógena.

•El daño es por toxinas preformadas por los patógenos en el exterior del hospedador y luego son ingeridas.

•Los síntomas se desarrollan luego que el microorganismo se adhiere se fija en la mucosa intestinal y se multiplica antes de provocar daño tisular.

•En las intoxicaciones los síntomas digestivos comienzan rápidamente

Enfermedad diarreica de etiología infecciosa

Definición:

Síndrome clínico de etiología diversa producido por la alteración en el transporte y absorción de electrolitos y agua, que genera el incremento en el número de deposiciones diarias y alteración en la consistencia de las heces. Puede estar acompañado de nauseas, vómitos, dolor abdominal y fiebre

Etiología infecciosa: Bacteriana, viral o parasitaria Mecanismo de transmisión: a)Transmisión directa: Contacto persona a persona, ruta fecal-oral b) Transmisión indirecta: Agua o alimentos contaminados

Tipos de diarrea de etiología infecciosa 1. Diarrea aguda o secretora: coloniza intestino delgado, reducción de superficie de absorción (EPEC) o secreción de enterotoxina, alteración flujo agua y electrolitos, leucocitos escasos (0-5/campo). (Ej:V. cholerae, ETEC). El principal riesgo es la deshidratación 2. Diarrea aguda sanguinolenta: coloniza intestino delgado distal o colon, multiplicación en mucosa o secreción de citotoxina, destrucción parcial o total de la célula, sangre, mucus, pus, leucocitos (>20/campo). Puede ocurrir septicemia. (Ej: Salmonella spp., Shigella spp., EIEC, STEC) 1. Diarrea mucosa prolongada: coloniza el intestino grueso persiste más de 14 días. Posee mecanismos de virulencia que le aseguran una permanencia prolongada en el intestino (EAEC). El principal riesgo es la malnutrición.

Enfermedad Diarreica  Es un problema grave en Salud Pública  Altas tasas de morbi-mortalidad en países en vías de desarrollo  Alta tasa de morbilidad y costos en salud en países desarrollados  > 2000 millones de episodios por año (OMS)  5 millones de muertes por año en niños menores de 5 años.  85% de las muertes en niños < 1 año  En los países pobres, cada niño sufre 3 episodios/año  Dependiendo de los países, del 15 al 70% de los casos son causados por alimentos

Factores de riesgo y protectores para adquirir diarrea FACTORES DE RIESGO a) Condiciones socio-económicas: 1. Hacinamiento 2. Higiene deficiente 3. No acceso al agua potable 4. Sistema de eliminación de excretas ineficiente 5. Falta de acceso a la información 6. Dificultad de acceso a los servicios de salud 7. Analfabetismo 8. Desocupación b)

Manipulación de los alimentos 1. Falta de refrigeración de los alimentos 2. Preparación de los alimentos con demasiada antelación 3. Cocción insuficiente de los alimentos 4. Personas infectadas que manejan los alimentos

c)

Factores del huésped: 1. Edad menor a 1 año 2. Falta de lactancia materna exclusiva en los primeros 6 meses de vida 3. Uso de biberones 4. Desnutrición 5. Inmunosupresión

FACTORES DE PROTECCIÓN 1. Lactancia materna exclusiva durante los primeros 6 meses de vida 2. Alimentación complementaria adecuada a partir de los 6 meses 3. Medidas higiénicas adecuadas 4. Correcta manipulación de los alimentos

Mecanismo de la infección •Quimiotactismo •Colonización de la mucosa intestinal •Evasión de las defensas del huésped •Multiplicación •Daño celular del huésped

Mecanismos de patogenia 1. Adherencia a la mucosa intestinal y producción de enterotoxina (Vibrio cholerae, ETEC) 2. Adherencia a la mucosa intestinal y destrucción de las microvellosidades (EPEC, STEC) 3. Adherencia a la mucosa intestinal y producción de citotoxina (STEC) 4. Invasión de la mucosa y multiplicación intraepitelial (Shigella spp., EIEC) 5. Translocación a nivel de mucosa y proliferación en lámina propia y nódulos mesentéricos (Salmonella spp., Yersinia enterocolitica)

6. Translocación e infección generalizada (Salmonella Typhi y Paratyphi A y B)

Mecanismos de defensa del huésped 1. En boca: actividad antimicrobiana presente en la saliva (Lisozima e inmunoglobulinas) 2. En estómago: pH ácido 3. En intestino: peristaltismo, secreción de mucus, producción de sustancia antimicrobianas (lactoferrinas, IgA secretoras), competencia con la flora normal

Argentina Estrategias de Vigilancia Epidemiológica  Notificación de casos clínicos de diarrea al Sistema Nacional de Vigilancia de la Salud (SNVS-Módulo C2), es obligatoria, semanal, agrupada por edad y sexo  Vigilancia Basada en Laboratorio (SNVS-Módulo SIVILA): Red Nacional de Diarreas y Patógenos Bacterianos de Transmisión Alimentaria (agrupada o caso individual)  Vigilancia Molecular: PulseNet de América Latina y El Caribe (Salmonella spp, Vibrio cholerae, Listeria spp., Campylobacter spp., Cronobacter spp., Shigella spp., E. coli productor de toxina Shiga)

SISTEMA DE VIGILANCIA DE LABORATORIO Módulo (SIVILA)

[email protected]

Red Nacional de Diarreas y Patógenos Bacterianos de Transmisión Alimentaria Misión Fortalecer el sistema de vigilancia de las diarreas y de los patógenos de transmisión alimentaria a través de la organización de una Red Nacional, con componentes de las áreas humana y de alimentos, integrados a un sistema multidisciplinario y trabajando bajo normas de gestión de calidad reconocidas, de manera de obtener un diagnóstico microbiológico confiable, oportuno y reproducible para ser utilizado en el mejoramiento de la atención del paciente y en la prevención de brotes. Patógenos bajo vigilancia          

Escherichia coli O157 y STEC no-O157 Escherichia coli diarreigénico Salmonella spp. Shigella spp. Vibrio cholerae O1 y no-O1 Listeria monocytogenes Campylobacter spp. Staphylococcus aureus Bacillus cereus Clostridium spp.

Actividades             

Estandarización metodológica Envío periódico de muestras y/o aislamientos Provisión de reactivos específicos Diagnóstico referencial Comunicación de resultados a nivel local, regional y nacional Consolidación anual de datos Sistema de alerta para la comunicación de situaciones inusuales o emergentes Informatización de la información mediante software específico: SIVILA Implementación de Programas de Evaluación Externa de la Calidad Capacitación continua (cursos, talleres, pasantías) Difusión de Manuales de Procedimientos Diseño y ejecución de proyectos de investigación Interacción con otras Redes

Red de Diarreas Bacterianas Estructura Jujuy (27)

Salta (22) Tucumán (8) Catamarca (11) Sgo. del Estero (0) La Rioja (5)

Chaco (50)

Misiones (39)

Corrientes (0)

Santa Fe (27)

San Juan (24)

Córdoba (10) Mendoza (21)

Formosa (27)

Entre Ríos (0)

C.A.B.A. (20) n=8

San Luís (12)

Buenos Aires (134) La Pampa (26)

Neuquén (23)

Regiones: CUYO: La Rioja, Mendoza, San Juan, San Luís NEA: Formosa, Misiones, Chaco, Corrientes, Entre Ríos NOA: Catamarca, Salta, Jujuy, Tucumán, Sgo. del Estero SUR: Chubut, La Pampa, Neuquén, Río Negro, Santa Cruz, Tierra del Fuego CENTRO: CABA, Buenos Aires, Córdoba, Santa Fe

Río Negro (28)

LABORATORIOS Nivel I: 213 Nivel II: 127 Nivel III: 143 Nivel IV: 57 LRN: 4

Chubut (19)

Santa Cruz (14)

Tierra del Fuego (2)

Fuente: Área Vigilancia-SNVS-Módulo SIVILA Dirección de Epidemiología- Ministerio de Salud

Diarreas - Argentina

Tasas de diarrea/100000 habitantes según provincia. Argentina, 2014

Diarreas: casos y tasas acumulados por cada 100000 habitantes, SE 1 a 53. Argentina, 2014.

2013 Total país

Casos Tasas 1238939 3088,17

2014 Casos 1175253

Tasas 2929,42

Diferencia Tasas -5 %

Corredor endémico semanal para diarreas, Argentina 2014. Histórico de 5 años: 2009 a 2013

Fuente: SNVS C2.

Fuente: Área Vigilancia-SNVS-Módulo C2 Dirección de Epidemiología- Ministerio de Salud

Diarreas - Argentina Tasas de diarreas por 100000 habitantes por año y región. Período 2010-2014

NOA SUR CUYO NEA CENTRO

Fuente: C2 SNVS.

Diarreas bacterianas y virales: casos positivos y porcentaje de positividad SE 1 a 53 de 2014. Argentina.

Diarreas bacterianas, agentes identificados por semana epidemiológica 2014. N=6200. Argentina.

Fuente: SIVILA.

Aislamiento de E. coli diarreigénico, Salmonella spp., Shigella spp. y V. cholerae a partir de materia fecal Hisopado rectal o evacuación espontánea

Leucocitos

EMF

Parásitos CTS MAC

mPCR1/mPCR2 (tamizaje)

PCR (confirmatoria)

SMAC

Se (Salmonella spp.)

CT-CTS

SMAC

mPCR rfbO157/stx1/stx2 (tamizaje)

PCR (confirmatoria)

mPCR para serov. TCBS / TSA Salmonella y serotipos S. flexneri

MAC MAC SS SS

TSI

LIA

Bqcas. mínimas Oxidasa/Kligler/LIA /Indol

TSA Caldo flagelar

mPCR ctx/tcpA El Tor Bqcas. complementarias

Pruebas bqcas. Serología “O” Serología “H”

EPEC ETEC STEC EIEC EAEC

Pruebas Bqcas. Seroagrupamiento ATB

APA

mPCR O1 / O139

Serología O1, O139

STEC O157 y no-O157

Pruebas fenotípicas Pruebas genotípicas Subtipificación

Salmonella Shigella

V. cholerae O1, O139, no-O1 no-O139

Serovariedades de Salmonella

Aislamiento de Campylobacter spp. a partir de materia fecal Muestra de material fecal

Examen microscópico directo en: - Contraste de fase, campo oscuro u óptico - Tinción de Gram

Aislamiento directo

Aislamiento indirecto (optativo)

Placas de medio selectivo Skirrow-Mccda

Enriquecimiento Caldo Bolton (24 h a 42 - 43 ºC)

Incubación 24 - 48 h a 42 - 43 ºC En condiciones de microaerofilia

Identificación presuntiva: -examen microscópico directo (contraste de fase) (tinción de Gram) - prueba de oxidasa - prueba de catalasa

Pruebas bioquímicas: - Hidrólisis del hipurato - Hidrólisis del indoxil acetato - Sensibilidad a NAL y CEF

Identificación final

PCR C. jejuni /coli / lari